大豆耐盐qtl定位及耐盐相关基因克隆

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1、中文摘要土壤盐渍化是影响农业生产的主要非生物因素之一。利用分子生物学手段培育耐盐品种是提高盐渍化土壤利用率的一条有效途径。本研究的目的是利用SSR分子标记技术，结合苗期耐盐鉴定结果，定位大豆耐盐QTL，旨在筛选出与大豆耐盐QTL紧密连锁的分子标记，以期为大豆分子辅助选择育种提供参考。同时克隆耐盐相关基因，进行初步分析，为进一步阐明大豆耐盐机理奠定基础。本研究以冀豆12和冀nf58的F6．11重组自交系群体的156个株系为试验材料，对群体及其亲本的耐盐性进行评价，采用SSR标记构建遗传连锁图，对耐盐QTL进行定位，并采用生物信

2、息学对盐胁迫诱导表达基因进行分析，研究结果如下：1．利用耐盐级别和SPAD值两项指标对重组自交系群体的耐盐性进行鉴定，结果表明，群体的耐盐性差异显著，SPAD值与耐盐性呈显著性正相关。2．采用Mapma瑚gerQTXb20软件对143个SSR标记进行连锁分析，构建了一张包括98个SSR标记，分布于28个连锁群的遗传连锁图谱，覆盖基因组长度为1035．3cM。标记间的平均距离为10．56cM。3．采用复合区间作图法对耐盐级别和SPAD值两个性状进行QTL分析，结果表明，以耐盐级别为指标检测到一个主效耐盐QTL，位于N连锁群上标

3、记Sat285和Satt660之间，贡献率为30．O％；以SPAD值为指标在N连锁群上定位到一个耐盐QTL，位于标记S甜312和Sat091之间，贡献率为18．1％。均位于分子标记Sat285和Sat091之间。4．在冀豆12和冀lIe58中分别克隆了5个盐胁迫诱导表达基因，其中4个基因序列在两个材料中无差异，有1个基因序列在两个材料中有差异。关键词：大豆；耐盐性；重组自交系；SSR；QTLABSTRACTSalmitysoilisoneofthem萄orabioticstressfactorsthatrestrictsag

4、riculturalproduction．Themostemciencystrateg)，ofutilizingsalmized-soilistobreednewvarietiest01eranttosah-s仃essbyusmgbiotechnologies．Inthisstudy，wescreenedSSRmarkersanddetectedQTLassociatedwithsan-tolerallceiIlsoybean．0urresultscouldbeusedform2urker-assistedselection

5、i11thesoybeanbreediI培programtoimproVesahtolerance．Me疵iIIle，thegeneswhicharerelatedsah—tolerancewereclonedfortheprelimillaryamlysis，andthisstudyprovidedhelpmltraceaboutthemolecularmeckmismofsalt-tolerancei11soybean．Thepu印oseofthisstudywastoassessthesalttolerancerati

6、ngandmapthesah-tolerantQTLof156F6：1lRILsderiVed丘omacrossbet、Ⅳeent11esoybeancultivarJidoul2andJir岱8，．1rvvotraits，sahtoleranceratillgandleafclllorophyllcontent(SPAD)Values、vereusedtoident坶thcsahtolerallceofthepopulations．Thegenes，whichlocatedattIlcm旬orsalt-toleramQTL

7、a11dtherelatedmetab01icpathwaysofsaltstressiIlducedexpression，wereclolledarldwerea11alysedusillgbioillformatics．Theresl】ltsares1】marizedasR1110ws：1．’I‘hetwotraits，santoleranceratillgandSⅣ奶ValueswereusedtoeⅦluatethesalttoleranCeofF6：11砌Lspopulations．Theresultshowedt

8、hattheSPADValueswerecominuousdistributioni11thepopulations．SPADValuesandsalttoleranceshowedsignificampos“iVecorrelation．2．Atotalof98SSRmarkerswer