临床免疫检验仪器

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1、第十一章临床免疫检验仪器学习要求掌握临床免疫检验常用仪器的特点;熟悉临床免疫检验常用仪器的分析原理;了解临床免疫检验常用仪器的使用与维护。主要内容酶免疫分析仪发光免疫分析仪放射免疫分仪析仪免疫浊度分析仪时间分辨荧光免疫分析仪第一节酶免疫分析仪一、酶免疫技术的分类二、酶免疫分析仪的类型、工作原理及结构三、酶免疫分析仪的性能评价及维护保养四、酶免疫分析仪的临床应用根据是否需要分离结合与游离的酶标记物，可分为:酶扩大免疫测定非均相酶免疫测定克隆酶供体免疫测定液相酶免疫法均相酶免疫测定固相酶免疫法(ELISA）一、酶免疫技术的分类基本概念二、酶免疫分析仪的类型

2、、工作原理及基本结构酶标仪一般简单的酶标仪只有读数、数据处理的功能，还需要配置孵育箱，洗板机，人工操作步骤繁琐。全自动酶联免疫系统集加样品、加试剂、孵育、震荡、洗板和酶标仪功能于一体。（一）酶免疫分析仪的类型-1微孔板固相酶免疫测定仪器(酶标仪)半自动微孔板ELISA分析仪全自动微孔板ELISA分析仪管式固相酶免疫测定仪器小珠固相酶免疫测定仪器磁微粒固相酶免疫测定仪器等（一）酶免疫分析仪的类型-21.微孔板固相酶免疫测定仪器(酶标仪)有单通道和多通道两种类型工作原理与主要结构和光电比色计相同和不同之处在于：比色液的容器是塑料微孔板以垂直光束通过待测液酶

3、标仪的工作原理图2.自动化酶免疫分析系统在酶标仪的基础上再加上配置:加样系统温育系统洗板系统判读系统机械臂系统液路动力系统软件控制系统系统优势-1自动化程度高：前后处理一体化设计，减少人与样品的接触机会，降低污染。能进行各种自动安全检测。稳定：只要避免人为操作错误，可连续数年良好工作。准确：不存在交叉污染，确保结果准确。系统优势-2高速：加注、读板速度快扩展性：软件可升级，样本量增加，可联机使用用户做主更多：开放式试剂；WINDOW操作系统；中/英/日自选操作界面；自定义编程；自动/自定义时间表；无限存档。三、酶免疫分析仪的性能评价及维护保养（一）性能

4、评价1．滤光片波长精度检查及其峰值测定；2．灵敏度和准确度；3．通道差与孔间差检测；4．零点漂移；5．精密度评价；6．线性测定；7．双波长评价；三、酶免疫分析仪的性能评价及维护保养（二）维护保养重点：光学部分1．滤光片波长精度检查2．通道差与孔间差检测四、酶免疫分析仪的临床应用１.病原体及其抗体的检测2.各种免疫球蛋白和细胞因子、补体3.肿瘤标志物4.多种激素5.药物和毒品等。第二节发光免疫分析仪将发光反应与免疫反应相结合的免疫分析方法采用微量倍增技术，敏感性度，特异性好，所用试剂安全、稳定；检测范围广泛，从传统的蛋白、激素、酶乃至药物均可检测发展迅速

5、，各种仪器不断出现，自动化程度越来越高。一、发光免疫的分类-1酶促化学发光：辣根过氧化物酶系统碱性磷酸酶系统黄嘌呤氧化酶系统非酶促化学发光：吖啶酯系统草酸酯系统三价铁-鲁米诺系统闪光（Flash）发光时间在数秒内，如吖啶酯以原位进样(InSituInjector)和时间积分法测量辉光（Glow）发光时间在数十分钟以上，如：-HRP-Luminol系统-AP-AMPPD系统-黄嘌呤氧化酶系统无须原位进样、以速率法测量。按发光持续时间一.发光免疫的分类-2时间发光信号辉光坪区速率法测量原位进样积分法测量闪光尖峰闪光-辉光测量方式差别消除放射性危害无半衰期限

6、制，试剂稳定性、有效期延长实现连续、动态、重复测定优越性-1闪光-辉光测量方式差别适合于复合标记系统多指标测定操作简单，反应快，易实现自动化灵敏度和线性范围超过以往技术优越性-2闪光-辉光测量方式差别三.发光免疫技术分类根据示踪物检测的不同而分为：荧光免疫测定电化学发光免疫测定化学发光免疫---再根据标记物的不同又分：-化学发光免疫分析-微粒子化学发光免疫分析-电化学发光免疫分析-化学发光酶免疫分析-生物发光免疫分析临床以前三者较为常用。三.发光免疫分析的基本测定方法根据发光反应检测方式的不同可分为1．液相法反应在液相中进行，经离心或分离措施后，再进行

7、测定发光强度2．固相法将抗原抗体复合物结合在固相载体(如聚苯乙烯管)或分离介质上(如磁性微粒球等)，再进行测定发光强度3．均相法同均相酶免疫法，不需要经过离心或分离步骤，即可直接进行发光强度检测夹心法特点分析灵敏度（最低检测限）（95%可信度）：S0+2SD在该曲线上所对应的浓度值。功能灵敏度：测定误差（变异）≤20%的最低可检测浓度。线性范围：功能灵敏度---变异≤20%的最高检测浓度。相关系数：≥0.99的曲线范围。四、发光免疫分析仪的种类、工作原理和基本结构(一)全自动化学发光免疫分析系统采用化学发光技术和磁性微粒子分离技术相结合的免疫分析系统(

8、一)全自动化学发光免疫分析系统1．仪器测定原理该类分析技术有两种方法：-竞争法测定小分子抗原物