cm1850 冷冻切片机使用体会

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1、LeicaCM1850冷冻切片机的使用体会组员：李丹吴哲侯宇华一.总述冷冻切片是借助在低温的条件下，使组织迅速冻结达到一定硬度进行切片的一种方法。冷冻切片技术距今已近有100多年的历史，适用于新鲜样品的切片，包括动物的器官如：心、肝、肾等；也可用于植物器官的切片，如根、茎、叶等。与石蜡切片比，其优点在于快速、方便，切好的片可直接染色处理。因此，制作一套高质量的冷冻切片对于确保生物分析的科学性、可靠性是极其重要的。如今，绝大多数的科研单位都有国产或国外的冷冻切片机，冷冻切片已经成为日常工作中不可或缺的一部分。二.切片机

2、使用原理冷冻切片是借助低温使组织冻结达到一定的硬度并通过冰起支撑作用来进行切片的一种方法。速冻可减小冰晶直径，避免组织细胞损伤。制冷压缩机佛里昂制冷、半导体温差电制冷三.切片机简介1冷冻切片机CM18502废液缸3控制面板14控制面板25储存架，左侧6储存架，右侧7自动总保险丝8固定吸热器（附件）支架9快速冷冻架10Peltier元件（附件）11置物台（附件）*12固定吸热器（附件）*13标本盘14隔热板（附件）15切片废料盘16刷架17可定向的标本头18刀架基座（附件）19刀架CE（附件）20刀架CN（附件）21刀

3、架CS（附件）控制面板一灯光按钮ON/OFF开关用于冷冻箱照明。手动除霜按钮用于激活和终止手动除霜。锁定按钮锁定解锁定控制面板以避免无意修改输入的参数。要锁定或解锁定，按下约5秒。设置时间设置自动除霜时间选择冷冻箱温度快速冷冻架的手动除霜控制面板二将标本远离刀片•按下后标本开始向后部末端快速返回。当标本头运动时，LED（1）闪烁。到达后部末端时，LED（1）开始发光。•可以通过按下粗进料按钮之一停止往返运动。•按下后标本开始向后部末端慢速返回。标本会向后部末端缓慢移动，只要按钮处于按下状态。向刀片移动标本•按下标本向

4、着刀片快速或慢速移动。只要按钮按下就进行向前的移动。这是一项安全特性保护标本和刀片免于损坏！到达前部末端时，按钮的LED（2）开始发光。快速冷冻架冷冻箱具有一个快速冷冻架可以放置多达10个标本盘。快速冷冻架的温度通常都低于冷冻箱温度。•将标本切至一定大小。•室温下添加足量冷冻化合物与标本盘中。•将标本置于盘中并定向。•将标本盘置于快速冷冻架的一个孔中，在低温下冷冻标本。•标本冷冻后，将标本盘插入标本头上并开始切片。标本盘将标本盘插入标本头•将手轮的把手锁定于较高的位置。•刀架和刀都到位后，用护刀器覆盖在刃缘上。•松开

5、标本头的螺丝。•将标本盘的轴插入刀标本头的定位孔中。确定标本盘的轴已完全插入。棱柱全部后表面必须与标本头良好接触。•重新旋紧螺丝。标本定向•要放开标本，松开螺丝。•用控制杆确定标本面的方向。•重新旋紧螺丝。切片修整标本•将预冷的刀/刀片插入并固定在刀架上。•调整适当的刀架间隙角。对于大多数情况而言，调整到4°和6°之间（刀架CN和CS）或1°和2°之间（刀架CE）是合适的。•将刀架/刀与标本准直。•拆下护刀器（刀架CN、CS）或向左折叠玻璃防倾导杆（刀架CE）。•打开手轮。•用粗进料按钮将标本移向刀片修整标本。旋转手

6、轮降低标本至需要的切片平面。•在刀上放置防倾导杆并与刃缘准直。切片厚度设置通过旋转旋钮可以在1到60um的范围内调整切片厚度：从0-10um,1um增幅。从10-20um,2um增幅，从20-60um,5um增幅。选择的切片厚度显示在切片机的指示标记上。•用切片机上的控制旋钮选择需要的切片厚度。用约20um的厚度开始切片。•将切片厚度连续降低到合适数值。从某一切片厚度变换到另一厚度时，应当舍弃前两三个切片。•切片时，匀速旋转手轮。四.方法冷冻切片机操作方法1.取材。2.取出组织支承器，放平摆好组织，周边滴上包埋剂，速

7、放于冷冻台上，冰冻。3.将冷冻好的组织块，夹紧于切片机持承器上，启动粗进退键，转动旋钮，将组织修平。4.调好欲切的厚度，一般在5～10um间。5.调好防卷板。制作冰冻切片，关键在于防卷板的调节上，这就要求操作者要细心，准确地将其调较好，调校至适当的位置。切片时，切出的切片能在第一时间顺利地通过刀防卷板间的通道，平整地躺在持刀器的铁板上。这时便可掀起防卷板，取一载玻片，将其附贴上即可。注意事项：1.防卷板及切片刀和持刀架上的板块应保持干净，需经常用毛笔挑除切片残余和用柔软的纸张擦。有时需要每切完一张切片后就用纸擦一次。

8、因为这个地方是切片通过和附贴的地方，如果有残余的包埋剂粘于刀或板上，将会破坏甚至撕裂切片，便切片不能完整切出。2.放置组织冰冻前，应视组织的形状及走势来放置，所谓“砍柴看柴势”，切片也是如此，如果胡乱放置，就不能收到很好的效果。3.组织块不须经各种固定液固定。4.当切片时，如果发现冰冻过度时，可将冰冻的组织连同支承器取出来，在室温停留片刻，再行