小鼠肠道菌群传递食物过敏敏感性的研究

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1、英汉缩略语名词对照英文缩写英文全称中文译名GFmiceGerm-freemice无菌小鼠SPFSpecificpathogenfree无特定病原体FAFoodallergy食物过敏16SrRNA16SribosomalRNA16S核糖体RNAPCRPolymeraseChainReaction聚合酶链式反应PCAPrinciplecomponentanalysis主成分分析rpmRevolutionsperminute转数/分DDWDouble-distilledwater双蒸水HRPHorseradishperoxidase辣根过氧化酶DGGEDenaturingGradient

2、GelElectrophoresis变性梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳HEHaematoxylinEosin伊红苏木素BSABovineserumalbulin牛血清白蛋白dNTPDeoxyribonucleosidetriphosphates脱氧核糖核苷三磷酸bpBasepair碱基对OVAOvalbumin卵清蛋白RNAaseRibonucleaseRNA酶TEMEDN，N，N’，N’-tetramethylenediamineN，N，N"，N’-四甲基乙二胺IgImmunoglobulin免疫球蛋白EDTAEthylenediaminetetraaceticacid乙二胺四乙酸UPG

3、MAUnweightedPairGroupMethodwithArithmeticMean非加权配对聚类分析ELISAEnzyme-linkedimmnosorbentassay酶联免疫吸附测定BlastBasicLocalalignmentsearchtool局部比对检索工具小鼠肠道菌群传递食物过敏敏感性的研究食物过敏是一种常见的变态反应性疾病。在发达国家，成人的发病率为3~4%，儿竜的发病率为5%"，但是，食物过敏的发病机制尚不清楚。与其他变应性疾病相同，食物过敏有一定的遗传背景［2］。然而，仅用遗传因素的作用不能解释食物过敏发病率在过去十年内骤增的现象，却提示可能一些与生活方

4、式相关的环境因素参与了其发病。环境因素作用于具冇遗传易感性的宿主，可能是促进其发生的原因［3］。早在1989年，“卫生假说”就提出，生命早期微生物暴露的减少，影响了生后免疫系统的成熟，增加了过敏性疾病的发生［4］;最近的研宄乂发现，生命早期微生物多样性的减少，也可以影响免疫成熟，增加儿童吋期过敏性疾病风险［5＜。因此，在食物过敏机制的研宂屮，微生物与食物过敏的关系成为近年的研究热点。从食物过敏流行病学和人群对某些特定食物发牛.过敏的情况可以看山，对于特定食物，大部分人是可以耐受的，发生过敏反应的仅仅是少部分人，这种现象在动物研宄中也有发现。陈玉梅［8］等人在用卵清蛋白(OVA)构建

5、BALB/c小鼠食物过敏模型时发现，有12.5%的小鼠用OVA刺激后不出现腹泻。不同的是，人类表现为少数人过敏，而实验BAUVc小鼠表现为多数过敏，表明了BALB/c小鼠对特定食物过敏的敏感性远远高于人类，可能与其是近交系小鼠，基因竹景一致有关。由于其基因背景的高度一致性，因此可以认为，环境因素在小鼠对OVA刺激后产生的过敏反应屮发挥了作用。己有的流行病学研宄和动物实验证实，食物过敏的发生与肠道菌群密切相关［9H2］。研究也证实肠道菌群与宿主的免疫反应冇关，无菌小鼠由于缺乏肠道菌群，使其容易对食物抗原发展成TH2和IgE反应［12’13］。那么，肠道菌群的不同是否是导致BALB/c

6、小鼠对OVA反应不同的原因呢？为了验证以上推测，我们选用无菌BALB/c小鼠接种不同粪便菌群构建食物过敏模型进行研宂。1材料与方法1.1实验材料1.1.1实验动物SPF级雌性BALB/c小鼠（4-5周龄），体重18〜20g，40只，由第三军医大学实验动物中心提供，合格证号SCXK（渝）2007-0002。自由进食和饮水，饲养环境为温度20〜23"C,湿度40〜70%，严格控制12h光照12h黑喑。无菌BALB/c小鼠20只，由第三军医大学实验动物教研室提供。无菌小鼠的饲养环境为温度20-23°C,湿度40〜70%,严格控制12h光照12h黑暗。60KGyCo-60y射线辐照灭菌的不

7、含鸡蛋的特殊饲料自由进食和饮水（饮用水、垫料、鼠笼和饮水瓶等均在121°C下高温高压灭菌法60min）。以不合鸡蛋的特殊饲料喂养，饲料棊本成分均按规定的实验动物营养需要量配制，具体如下：动物饲料配方（每50Kg含量）：玉米12.5Kg鱼粉7Kg豆粕7.5Kg复合维生素80g次粉10Kg骨粉lKg食盐0.5Kg植物油0.75Kg麦麸5Kg动物油0.25Kg鱼肝油0.5Kg酵母2.5Kg维生素E0.25Kg水4L1.1.2主要试剂及材料氢氧化钠酚/氯仿/异戊醇（25:24