支原体肺炎患儿外周血中treg细胞的变化及临床意义

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1、支原体肺炎患儿外周血中Treg细胞的变化及临床意义谭国芳1熊远青2刘晓燕2黄河2(1深圳市光明新区人民医院518033；2深圳市福田区人民医院518033)【摘要】目的通过检测不同时期MPP患儿外周血Treg细胞及其分泌细胞因子IL-10、TGF-β水平，进一步探讨支原体肺炎的发病机制。方法MPP患儿分别在急性期(发病<2W)及病程4W清晨空腹抽取外周静脉血5mL,流式细胞仪检测外周血Treg细胞百分率,采用ELISA法检测细胞因子IL-10、TGF-β水平。结果MPP急性期Treg细胞数量及IL-10、TGF-β水平均明显降

2、低，急性期MPP组Treg细胞百分率显著低于正常对照组(P<0.05),IL-10、TGF-β水平低于非MP感染肺炎组及正常对照组(P<0.05)。病程4W,MPP组Treg细胞百分率有明显提高(P<0.05>,MPP组及非MP感染肺炎组及正常对照组比较仍低(P<0.05),非MP感染肺炎组及正常对照组无统计学差异(P〉0.05),MPP组及非MP感染肺炎组IL-10、TGF-β水平有明显提高(P<0.05)，MPP组低于非MP感染肺炎组及正常对照组(P<0.05>。非MP感染肺炎患儿与正常对照组IL-10、TGF-β水平无统计学差

3、异(P〉0.05｝。结论MPP急性期存在明显的免疫失衡，Treg细胞数量明显降低导致的免疫抑制功能不足可能是免疫失衡的原因之一。【关键词】肺炎支原体肺炎Treg细胞儿童【中图分类号】R725.6【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2013)16-0138-02肺炎支原体肺炎(Mycoplasmapneumoniaepneumonia,MPP)是小儿肺炎的常见类型之一，是由肺炎支原体(Mycoplasmapneumoniae,MP)引起的间质性肺炎。MPP好发于5岁以上年长儿，近年来发病年龄明显提前，发病率也有所增加，且婴幼儿发病也逐渐增多［1】。同时

4、还常伴有广泛多器官、多系统的肺外并发症，并且和支气管哮喘的发作关系密切［2］。研究表明MP感染与体液免疫、细胞免疫均有关，存在机体免疫反应、免疫逃逸、免疫调节、免疫抑制等。但MP感染的发病机理仍不十分清楚。本研究通过检测MPP患儿外周血Treg细胞及其分泌细胞因子IL-10、TGF-β水平，进一步探讨支原体肺炎的发病机制。1资料与方法1.一般资料随机选取2011年1月〜2013年1月收治本院儿科的急性期MPP患儿40例，其中男性患儿21例，女性患儿19例，平均年龄5.7±2.9岁，病程在2w以内，入院后采用固相酶联免疫吸附试验检测血清特异

5、性MP抗体IgM,阳性者入选。诊断均符合胡亚美等主编的《诸福棠实用儿科学（第7版）》MPP诊断标准；同期在我院住院的非MP感染性支气管肺炎患儿20例做为阳性对照，诊断标准同样参照《诸福棠实用儿科学（第7版）》支气管肺炎的诊断标准；正常对照组为来自我院门诊经家长同意的健康体检儿20例。均无过敏性疾病及其他慢性病史，无家族过敏史及哮喘史，两周内无感染及服药史。入选患儿均为足月产儿，排除先天性心脏病、先天性肺发育不全、营养不良及免疫缺陷等其他疾病。本研宄取得入选对象监护人知情同意（签订知情同意书），并获医学伦理委员会批准同意。2.材料抗人CD4-FITC单克隆抗体（m

6、Ab）、抗人CD25-PE-Cy5mAb、抗人CD127-PEmAb以及同型对照lgGl-PE-Cy5和IgGl-PE均购自美国W克曼（Beckman）公司。外周血细胞因子IL-10与TGF-β酶联免疫吸附试验（EUSA）试剂盒购自美国R&D公司。流式细胞仪、溶血制备仪（美国贝克曼库尔特公司酶标仪（美国Thermo公司）。3.标本采集及检测MPP患儿分别在急性期（发病<2W）及病程4W清晨空腹抽取外周静脉血5mL（EDTA抗凝），非MP感染性支气管肺炎在急性期（发病<7d）及病程4W抽取外周静脉血（方法同上），健康对照组同样方法采血1次，其

7、中取抗凝血2mL,4000r/min离心lOmin，取上清置于EP管内，一70°C保存备用。流式细胞仪检测外周血Treg细胞百分率。采用EUSA法检测细胞因子11_-10、TGF-β水平，具体步骤严格按说明书进行。4.统计学分析所测数据以x-±s表示，应用SPSS13.0统计软件对数据进行统计学分析，多组之间的比较先进行正态性和方差齐性检验，对于满足条件的计量资料进行单因素方差分析，组间比较采用q检验。P<0.05为差异有统计学意义。2结果1.外周血Treg细胞百分率经流式细胞仪对细胞表面标记分子的检测,急性期MPP组患儿外周血Treg细

8、胞百分率显著低于正常对照