散发性结直肠癌的msi与临床病理特点的关系

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1、散发性结直肠癌的MSI与临床病理特点的关系(成都中医药大学附属医院四川成都610072)【摘要】目的：通过微卫星位点的分析，了解散发性结直肠癌中的微卫星不稳定性的阳性率，并探讨其与临床病理特点的关系。方法：收集131例结直肠癌的血液和肿瘤标木，分离DNA，荧光标记引物后通过PCR扩增，并在DNA测序仪上进行毛细管电泳，Genescan软件收集扩增片段进行分析。结果：131例结直肠癌中27例(20.6%)为MSI-H阳性，30例(22.9%)为MSI-L,75例(57.3%)为MSS。MSI与患者的年龄，肿瘤的大小相关(P<0.05),而在性别、发病部位、肿

2、瘤分化程度方面差异无统计学差异(P>0.05)。结论：根据MSI对散发性大肠癌进行分类有重要的理论和实际意义。【关键词】散发性结直肠癌；微卫星不稳定；病理特点【中图分类号】R730.2【文献标识码】A【文章编号】1007-8231(2016)22-0025-02MicrosatelliteinstabilityofsporadiccolorectalcanceranditsclinicopathologicalsignificanceTheAffiliatedHospitalofChengduUniversityofTraditionalChineseMe

3、dicine,Chengdu610072,Sichuan,China【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheincidenceofmicrosatelliteinstability(MSI)insporadiccolorectalcancerandtheassociationwithclinicopathologicalcharacter.MethodsThebloodandtumorsamplesof131casesofcolorectalcancerwerecollected.GenomicDNAwasextractedfrom

4、tumortissuesandmatchedblood.MicrosatelliteanalysiswasperformedusingfluorescentPCRfollowedbyfragmentanalysisonautomaticDNAsequencerwithGenescansoftware.Results27outof131sampleswasMSI-Handsignificantlyassociatedwithpatientageandtumorsize(P<0.05),butnottumorsite,stagenordifferentiati

5、on(P>0.05).ConclusionTheclassificationofsporadicCRCaccordingtoMSImaybeofimportanceboththeoreticallyandpractically.[Keywords]Sporadiccolorectalcancer;Microsatelliteinstability;Clinicopathologicalfeature大肠癌是最常见的恶性肿瘤之一，其发生、发展是一个多基因多步骤的复杂过程，其中涉及到癌基因的激活和抑癌基因的失活。基因遗传不稳定性如微卫星不稳定(microsat

6、elliteinstability,MSI)可能是产生突变，导致肿瘤发生、发展的重要分子事件。本研宄就最近收治的散发性大肠癌的MSI水平进行检测，并探讨其临床病理生物学特征。1.资料与方法1.1病例收集收集成都中能够医药人学附属医院病理科2015年-2016年诊断的散发性结直肠癌131例，术前均未经过化疗，其中男性68例，女性63例，年龄27〜92岁。病变部位分为近端结肠39例，远端结肠21例，直肠71例。肿瘤术后病理类型：HE染色，3例缺失，有11例为黏液腺癌，2例低分化腺癌，其余115例为管状腺癌。高分化5例，中分化114例，低分化11例。1.2DNA的提取

7、采用TIANGEN的血液/细胞组织基因组DNA提取试剂盒(0录号DP304-03),严格安装说明书提取血液和肿瘤组织DNA。提取后在Nanodrop2000微量紫外分光光度计上进行浓度及波峰测试，并进行DNA电泳。1.3微卫星位点的分析1.3.1聚合酶链反应(PCR):BAT-25,BAT-26引物序列见表1，由上海生工生物有限公司合成。各引物上游标记荧光染料FAM。PCR反应体系：模板DNA2μl,10×BUFFER2μl,上游引物(10μmol八)1，下游引物(10μmol/L)1,dNTP(1.25mmol/L)2&mu

8、;hTaqDNAPoly