vegf在大鼠缺血再灌注损伤肝组织中的表达及其意

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1、VEGF在大鼠缺血再灌注损伤肝组织中的表达及其意【摘要】目的：探讨血管内皮生长因子（vascularendothelialgroin后恢复血流灌注，再灌注后1,6h处死大鼠收集标本。分别采用全自动生化分析仪、HE染色，比色法、ELISA法测定血清转氨酶(ALT,AST)，肝组织病理改变,肝组织髓过氧化物酶（MPO）的活性以及VEGF蛋白的含量。结果：与假手术组相比，缺血再灌注组（I/R组）缺血肝脏MPO活性，肝组织内VEGF蛋白的含量以及ALT，AST在再灌注1h即升高，且缺血再灌注6h时较1h明显升高；

2、缺血肝脏病理切片可见大量炎症细胞浸润，6h炎症反应更为剧烈，部分肝细胞呈点状坏死。结论：VEGF蛋白表达的上调可能参与了大鼠肝脏缺血再灌注过程中肝脏的损伤。【关键词】肝脏；缺血；再灌注损伤；血管内皮生长因子　　［Abstract］Objective:Toinvestigatetheexpressionofvascularendothelialgroia/reperfusioninjuryandsignificance.Methods：ThemaleSDratsalmodel.Afterischemiafo

3、r90min，SDratsliverensedfortestingthelevelsofalanineaminotransferase(ALT),aspartateaminotransferase（AST）andtheactivityofhepaticmyeloperoxidase(MPO).ThechangesofVEGFproteininischemicliverlobesinedbyELISA.Thelivertissuespathologicalchangesatoxylinandeosin(HE

4、)stained.Results：After90minofpartialliverischemia,theAST,ALTlevelinI/Rgroup-operated(SH)group,andAST,ALTlevelatthe6hreperfusionarklyhigherthanthatatthe1hreperfusion.TheexpressionofVEGFproteinandtheMPOactivityinhepatictissuesarkablyup-regulatedinI/Rgroupth

5、anintheSHgroupatthetimepointof1hand6hreperfusion.Theyanyinflammatorycellsemuchsevererat6hposT-reperfusionlivertissue.Conclusion：Theup-regulationofVEGFproteininhepaticI/Rinjuryprocessmightbeinvolvedintheprocessofliverinjury.　　［Keyia；reperfusioninjury；vascu

6、larendothelialgroeabilityfactor，VPF)，它是一种二聚糖，蛋白相对分子质量为34～45kD,由两个相同的亚基组成，是内皮细胞产生的特异性促有丝分裂原,具有促进内皮细胞增生、迁移，增加血管通透性和加速新血管形成的作用。本文通过观察大鼠肝缺血再灌注模型中肝组织内VEGF蛋白的表达，探讨其在肝缺血再灌注损伤中的作用。　　1材料与方法　　1.1主要试剂　　大鼠血管内皮生长因子ELISA试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司；髓过氧化物酶（MPO）测试盒购自南京建成生物工程研究所。　　

7、1.2动物分组及模型建立　　健康雄性SD大鼠，体质量（300±20）g，江苏大学医学院实验动物中心提供。将SD大鼠随机分成假手术组、肝缺血再灌注1,6h模型组，每组6只。手术前12h动物开始禁食而自由饮水，腹腔内注射戊巴比妥钠（30mg/kg）麻醉后，常规消毒、铺巾，上腹正中切口逐层进腹，分离肝门，无损伤动脉夹阻断肝脏中叶、左叶血供，90min后恢复缺血肝叶血供，建立70％肝脏缺血再灌注损伤模型，假手术组仅行麻醉、开腹、不阻断血流。各组在相应时间点处死大鼠，留取门静脉血清和缺血区肝脏组织。　　1.3肝脏V

8、EGF,MPO及肝功能检测　　肝脏VEGF蛋白含量采用大鼠血管内皮生长因子ELISA试剂盒进行检测，肝组织中的MPO采用髓过氧化物酶测试盒进行检测，操作按试剂盒说明进行。血清丙氨酸氨基转换酶(ALT),天冬氨酸氨基转换酶(AST)水平应用OlympusAu2700全自动生化分析仪(日本)进行分析,判定肝脏功能改变情况。　　1.4肝脏组织学检查　　取缺血肝组织经10%甲醛固定、石蜡包埋后常规切片和HE染色，显微镜下观察组织病理变