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时间:2018-11-14
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1、离子选择性电极法测定离子钙【关键词】离子选择性电极法 [关键词]离子选择性电极法;测定;离子钙 MeasurementIonCalciument;IonCalcium钙是体内生存离不开的元素,离子钙是生理活性钙,它比总钙更能反映出体内钙的代谢状态。钙的正常值范围小,更需要掌握其特点,创造良好的实验条件,用离子选择性电极法(ISE)测定钙优点较多,比EDTA滴定法精确度大,我们用ISE法测钙收到满意效果。 1资料与方法 1.1资料来源门诊病例52例,其中有小儿惊厥(1/12岁~10/12岁)
2、6例,晚期孕妇(22岁~37岁)15例,关节疼痛、四肢活动受限的老年人(58岁~70岁)11例共32例为症状组,正常体检20例为正常组。 1.2仪器 1.2.1仪器AFT500D电解质系列分析仪:深圳康立科学仪器有限公司提供。 1.2.2试剂EDTA滴定法测钙试剂盒:北京北化精细化学品有限责任公司提供。 1.3方法 1.3.1抽早晨空腹静脉血时,分别注入二支干燥试管内,一支定为一组,另一支定为二组。 1.3.2一组测定 1.3.2.1抽血后立即分离血清,同时用ISE法和EDTA滴定法
3、;二种方向各测其钙值。 1.3.2.2用ISE法测定离子钙 按仪器要求进行开机、活化、标定,待通过后进行血清吸样、测定,这一系列全由微机控制,电脑打印出结果。下面列表五项分别观察。 1.3.2.3用EDTA滴定法测总钙 取0.1ml血清于15mm×150mm试管内;另设标准管加标准液0.1ml;各加0.2mol/L的NaOH溶液1ml;各加钙红指示剂2滴;滴加EDTANa2溶液,边加边摇动试管,直至管内淡红色液变为淡兰色为终点,记录各管EDTANa2用量;计算:测定管EDTANa2用量(m
4、l)标准管EDTANa2用量(ml)×2.5=mmol/L。 1.3.3二组测定 1.3.3.1抽血后标本放置3h后离出血请进行测定。 1.3.3.2按一组的二种方法测定其离子钙和总钙。 2结果 见表1~表5。表1到表4可以看出各组各方法测定的结果正常组与症状组比较均有明显差别(P<0.01)。表1一组ISE浊测离子钙结果比较(略)注:P<0.01差别有显著意义。表2一组EDTA滴定法测总钙结果比较表(略)注:P<0.01差别有显著意义。表3二组ISE浊测离子钙结果比较(略)
5、注:P<0.01差别有显著意义表4二组EDTA滴定法测总钙结果比较(略)注:P<0.01差别有显著意义表5ISE法一组与二组值比较(略)注:正常组P>0.05差别无显著意义。症状组P<0.01差别有显著意义。 从表5看出,用ISE法测定离子钙,正常组的一组与二组差别不大(P>0.05),而症状组就有显著的差别(P<0.01)。 一组测定,ISE法,正常组CV是4.65%,症状组CV是5.59%;EDTA滴定法测定正常组CV是5.56%;症状组CV是6.79%
6、,由此看来,ISE法精密度高于EDTA滴定法,二组测定基本相似。 3讨论 经过统计处理,从表1到表4中可以看出各组各方法测定的结果,正常组与症状组比较均有显著的差别P<0.01,即低钙可以引起各种临床症状,说明钙在人体生存中占有重要地位。 因为离子钙比总钙更能反映出体内钙代谢的状态。ISE法测的就是离子钙,本法选择性变,标本用量少,操作简便,程序由微机控制,优点较多。从一组测定结果来看,正常组CV:4.65%,症状组CV:5.59%,EDTA滴定法正常组CV:5.56%症状组CV:6.
7、79%,说明ISE法精密度变于EDTA滴定法。 EDTA滴定法测的是人体的总钙,本法测定时钙红指示剂在碱性溶液中不稳定,终点不易观察,测定管和标准管变色有时不太一致,终点不好掌握,测定时必须了解,掌握其特点后加以改进以达到检验要求。 血液离体后CO2会很快丢失,使pH值升高,导致结合钙增加,离子钙测定偏低,经过统计学处理,从表5看出,标本放置3h后再离心测定(即二组测定),钙值偏低,症状组P<0.01,所以在采血后要尽快分离出血清进行测定(1h之内),这样才能使效果满意。
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