梗阻性黄疸大鼠血液中内毒素含量与组织形态学变化

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1、梗阻性黄疸大鼠血液中内毒素含量与组织形态学变化作者：姜宪，姜旭，申蓉硕，张虎［摘要］［目的］探讨梗阻性黄疸大鼠血液中内毒素含量与肝及小肠黏膜的形态学变化.［方法］监测假手术组、梗阻性黄疸1，2周组小鼠血胆红素及内毒素含量，采用光学显微镜及电子显微镜观察不同时期梗阻性黄疸大鼠肝及小肠黏膜的形态学变化.［结果］梗阻性黄疸1，2周组大鼠血胆红素及内毒素含量明显升高，与假手术组比较有显著性差异，且肝组织损伤随梗阻时间的延长而逐渐加重，但肠道黏膜的损伤则较轻微.［结论］发生梗阻性黄疸时内毒素血症的发生和发展与肠黏膜的屏障功能密切相关.　　［关键词］梗阻性黄疸;内毒素血症;组织

2、学ABSTRACT:OBJECTIVETostudythethecontentofplasmaendotoxinandthehistomorphologicalchangesofliverandsmallintestinalmembranecausedbyobstructivejaundiceinrats.METHODSAfterexecutingratsinobstructivejaundicegroupsfor1，2bilirubinandendotoxinonitoredandthehistomorphologicaltransformationoftheli

3、verandthesmallintestineicroscopeandelectronmicroscope.RESULTSThecontentofserumbilirubinandendotoxinintheobstructivejaundicegroupsfor1，2ageofliverageofthesmallintestinalmembraneuchslighter.CONCLUSIONPUS光学显微镜下观察，照相.1.2.5电子显微镜标本的制作术后1，2周处死动物，立即取大小为1cm×1cm×1cm的肝组织及1cm×1cm的小肠组织各4，5块，迅速放入预冷的

4、30g/L戊二醛溶液中固定，用PBS冲洗，再用10g/L四氯化碳溶液（pH值为7.4）固定，丙酮梯度固定脱水，用丙酮及EPON（812和815混合剂）浸透，再用EPON（812和815混合剂）浸透，聚合，包埋，制作超薄切片，行电子染色，在JEM-1200EX型电子显微镜下观察.1.2.6统计学处理血胆红素及内毒素含量比较采用方差分析方法.2结果2.1一般状态胆总管结扎48h后大鼠尿液颜色开始变黄，4～5d时全身皮毛开始转黄，进食量逐渐减少.术后1周及2周，梗阻性黄疸大鼠近肝侧胆总管囊状扩张，肝脏弥漫性肿大，呈黄褐色.2.2血清胆红素含量的变化梗阻性黄疸1，2周组大鼠

5、血胆红素含量与假手术组相比较明显升高，分别有显著性差异（P<0.05）;梗阻性黄疸1周组血胆红素含量与2周组相比较明显升高，两组间有显著性差异（P<0.05），见表1.2.3血液中内毒素含量的变化梗阻性黄疸1，2周组大鼠血液中内毒素含量与假手术组相比较有明显增高，有显著性差异（P<0.05），见表1表1梗阻性黄疸大鼠血清胆红素与血液内毒素含量的变化*与假手术组比较，P<0.05;#与梗阻性黄疸1周组比较，P<0.052.4形态学观察2.4.1光学显微镜观察假手术组:肝小叶结构完整，无变形及坏死（图1）;梗阻性黄疸1周组:部分肝小叶内可见

6、灶状及小片状坏死（图2）;梗阻性黄疸2周组:肝细胞损伤明显，肝小叶内可见多种形态的坏死灶，其内可见少量纤维细胞增生（图3）.2.4.2电子显微镜观察梗阻性黄疸组大鼠小肠黏膜细胞线粒体肿胀，嵴断裂（图4）;肝细胞体积增大，胞质密度疏松，各细胞器悬浮于胞质内，线粒体轻度肿胀，滑面内质网扩张，呈大小不同的泡状结构，粗面内质网相对减少，糖原颗粒分布稀疏，细胞核异染色质及常染色质分布不均匀，异染色质轻度边集（图5）;肝细胞之间的毛细胆管明显扩张，部分狄氏腔内可见增生的纤维组织（图63讨论据报道，梗阻性黄疸患者术前发生内毒素血症的比率为24%～68%，是引起此病高死亡率的主要原

7、因［1，2］.内毒素是存在于革兰氏阴性细菌细胞壁上，具有亲水及亲脂双重特性的基因复合物，主要成分为脂多糖（lipopolys-accharide，LPS）.LPS由3部分组成，即O-特异性多糖、核心多糖及脂类A.梗阻性黄疸内毒素血症发生的主要原因如下:1）由于胆汁不能排入胆道，失去了胆盐对细菌繁殖的抑制和对LPS的降解作用，使细菌异常繁殖，肠道菌群失调，内毒素生成增多，肠黏膜瘀血、水肿、坏死及脱落，绒毛萎缩，黏膜变薄，使大量肠源性内毒素通过已削弱的肠黏膜机械屏障及免疫屏障被吸收进入门静脉;2）肝网状内皮系统明显受抑制，肝枯否氏细胞功能降低，对内毒素的吞噬和降解能