nf-kb在2型糖尿病大鼠肾组织中相关表达的研究

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1、NF-kB在2型糖尿病大鼠肾组织中相关表达的研究王水秀1（通讯作者）马云青2（1井M山大学护理学院江丙吉安343009；2南昌大学第一附属医院干部科江两南昌330006）【摘要】目的探讨NF-kB在2型糖尿病大鼠肾组织中表达的变化。方法通过收集正常大鼠及糖尿病鼠的24小时尿标木，测定尿微量白蛋白；并摘取肾脏，行免疫组化观察NF-kB蛋白水平的变化。结果各组大鼠在肾小管可见NF-kB表达呈棕色颗粒样物，糖尿病小鼠中肾组织NF-kB表达明显升高（P<0.01）；尿微量白蛋白与NF-kB的表达密切相关，r=0.84（P<0.01）。结论2型糖尿病组大鼠肾脏组织NF-kB表达比正常组表

2、达增强。【关键词】NF-kB2型糖尿病胰岛素抵抗炎症反应随着老龄化社会的到来，2型糖尿病的发病率越来越高。在人们生活水平提高和运动量减少的今天，对糖尿病更要提高警惕，防患于未然。糖尿病的危害在于其并发症，糖尿病肾脏微血管病变的防治是糖尿病早期防治的重要环节，是医学科学研究的热点和难点。木实验我们观察糖尿病大鼠各项牛.化指标、肾脏早期结构及肾脏NF-κB表达的变化，探讨NF-κB在糖尿病肾病的作用机制，并为今后进一步研究提供理论依据。1材料与方法1.1动物模型的建立及分组体质量为（180-200）g健康清洁级SD雄性大鼠30只，随机分成2组，正常对照组（A

3、组），糖尿病模型组（B组），每组15只。出现胰岛素抵抗后，将链脲佐菌素（STZ）按25mg/kg体质量一次性腹腔注射，正常对照组腹腔内注射等体积柠檬酸缓冲液。1周后，尾静脉采血测定空腹血糖（采血前大鼠禁食12h）,以空腹血糖≥16.7mmol/L作为糖尿病造模成功标准。A、B两组大鼠再饲养6周，实验结朿前一H收集24小时尿标木，用于测定尿微量白蛋白；最后处死大鼠采血，摘取肾脏，部分肾组织用4%中性多聚甲醛固定，行免疫组化观察NF-κB蛋白水平的变化。1.2标本留取大鼠自实验前一日用代谢笼收集24小时尿标本。禁食12小吋，于次日经10%水合氯醛（0.3mg/kg

4、）腹腔注射麻醉后，开腹经下腔静脉穿刺采血，血样立即4°C、4000r/min离心5min,分离血清置-2（TC冰箱保存。部分肾组织4%中性多聚甲醛固定，行免疫组化。1.3肾脏组织免疫组化检查及NF-kB测定常规方法行免疫组化检査，并使用软件分析NF-kB的量。1.4统计学分析SPSS17.0统计软件对所得结果进行处理，计量资料用均数±标准差（x-±s>表示，相关性分析采用Pearson法，P<0.05有统计学意义。2结果2.1一般情况实验存活大鼠26只，其中A组15只，B组11只。4只大鼠在造模期间死亡，考虑死亡原因为高血糖，苏中A组无1只死亡

5、，B组死亡4只，死亡率为13.3%。实验期间，正常组大鼠体重渐增，精神状况良好，双0有神，反应敏捷，毛发光泽，糖尿病组人駁体形消瘦，精神萎靡，反应迟钝，毛发晦暗无光泽，并有典型的多尿、多饮、多食，体重减轻等糖尿病临床表现。2.2免疫组织化学结果各组人鼠在肾小管细胞中可见NF-κB表达呈棕色颗粒样物，细胞核及细胞浆均有表达，与A组比较，B组大鼠肾组织NF-κB表达水平明显升高（P<0.01）。（见图1）A组为正常大鼠肾组织；B组为糖尿病大鼠肾组织，B组表达明显强于A组。图1:2组大鼠肾组织免疫组化比较(×400)2.3尿微量白蛋白与NF-&ka

6、ppa;B表达的相关分析以尿微量白蛋白为应变量(Y),以NF-κB表达强度为自变量(X),采用相关分析方法，分析尿微量白蛋白与NF-κB表达的相互密切程度，分析相关系数r=0.84(P<0.01)o图4:尿微量白蛋白与NF-κB表达的相关分析图,r=0.84,(P<0.01)3讨论糖尿病患者常伴肾脏组织的改变，冇临床研究报道这与各种炎症因子密切相关。Hofmann等［1］对33名糖尿病患者进行外周血竽核细胞中NF-κB活性的测定,发现糖尿病肾病患者NF-κB结合活性更强，且其活性与蛋白尿程度相关，这表明NF-&kaPp

7、a;B活性与糖尿病患者肾组织病变程度密切关系。本研究发现糖尿病大鼠肾组织NF-κB的表达较正常组均明显增加，且24h尿微量白蛋白与NF-κB的表达均呈正相关，与文献报道一致。糖尿病吋氧化应激增强，细胞因子、生长因子及炎症因子表达增多，非氧因素对NF-κB的调节作用显著增强，如H202、、TNF-α、IL-6能抑制脯胺酰径化酶，减少NF-κB泛素化，稳定及促进NF-κB表达［2］;高糖使活性氧(ROS)生成增多，ROS活化