光电比色检验基础于到知识

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1、----------专业最好文档，专业为你服务，急你所急，供你所需-------------文档下载最佳的地方光电比色分析仪的基本知识概述：北京普朗公司的现有主要产品都是体外诊断医用设备（IVD产品），在《医疗器械分类目录》中该类产品的管理类别是6840-Ⅱ类。其注册工作由省级或直辖市药监局管理。是医院、卫生防疫站、血站、妇幼保健站等临床实验室及食品安全、动物检疫及科研实验室对样本进行检验的仪器。本公司现有主要产品属于光电比色分析仪器。仪器工作时检测到的原始信号是一个光信号，通过分析计算得到最终检验结果。因此光学系统的好坏对仪器的质

2、量起着决定性的作用。下面首先介绍一下光电比色的基本知识。一．光电比色检验的基本知识光电比色检验是指利用物质具有吸收、发射或散射光谱谱系的特点，对物质进行定性或定量的分析方法。它具有灵敏、快速、简便等特点，是生物化学分析中最常用的分析技术之一。1.1物质的溶液对光的选择性吸收现象物质的溶液为什么会有颜色，人看到的不同颜色，是不同波长的光对人眼睛产生的不同视觉效应。不同物质的溶液，只吸收与之对应的某个波长的光子能量，因此每种物质的溶液都有自己特定吸收光谱，即某种物质对某种波长的光有最大吸收（吸收峰），而对其他波长的光几乎不吸收或很少吸收

3、，人看到的溶液颜色只是未被吸收的可见光。因为不同物质的溶液，只吸收不同波长的光，所以人眼会看到不同物质的溶液呈现出不同的颜色。互补光：例如，紫（400~430）与绿(500~560)；兰(430~450)与黄(560~590)；青(480~500)与红(620~700)，互为互补光。如果看到的溶液是兰色，则溶液吸收的一定是黄色光。紫外光：λ小于400nm红外光：λ大于760nm1.2比色原理：----------专业最好文档，专业为你服务，急你所急，供你所需-------------文档下载最佳的地方----------专业最好文档

4、，专业为你服务，急你所急，供你所需-------------文档下载最佳的地方由于物质溶液颜色的深浅，是随溶液浓度的改变而改变，浓度越大，颜色越深。所以可以根据溶液颜色的深浅，来判定有色溶液浓度的大小。a)目视比色：即将待测溶液与已知浓度水平的，相同物质的标准溶液进行颜色比较，根据标准液的已知浓度和颜色深浅，从而判定待测溶液中所含待测物质的多少，达到进行定性分析和定量检验的目的。举例：目视比色法。b)光电比色法:显然目视比色法只能大概判定浓度，不能准确定量。为了解决准确定量的问题，科学家创建了光电比色检测法，用光电探测器代替人的眼睛

5、，进行比色检验。c)不同物质的吸收光谱曲线：下图是用分光光度计测得的A、B、C三种物质的吸收光谱曲线，可以看到A物质在390nm处有一吸收峰，而C和B在此处无吸收，由于A物质在390处具有高的吸收，因此用390波长的光检测该物质时，会得到很高的灵敏度。d)工作波长：为了提高仪器检验的灵敏度，应该选择待测物质的吸收峰波长作为检验波长，这样只要待测溶液中含有被测物质，就会对入射光产生明显的吸收（检测信号）。如果浓度变化，则会引起对入射光的吸收（检测信号）产生明显变化。因此在上图中选择560nm波长作为检测波长，就容易测得C物质浓度变化引

6、起的吸光度变化值，并依此计算出浓度值。很显然如果需要检测A，B的浓度，则应分别选择390nm,470nm作为工作波长。如果待测容器中既有A物质，又有B物质（伴随物），在需要检测A物质时，却选择了410nm作为工作波长，则必定受到B物质的干扰（因此时测得的吸光度值是A和B的总和）。e)单色光：为了减少其它物质对检测的干扰，检测波长的光谱范围应该越窄越好----------专业最好文档，专业为你服务，急你所急，供你所需-------------文档下载最佳的地方----------专业最好文档，专业为你服务，急你所急，供你所需-----

7、--------文档下载最佳的地方（但光谱范围越窄，在同一光源的情况下，获得的光能量会越小，信号会越弱）。在检验仪器中，一般利用干涉滤光片（一个滤光片只提供一种波长）或者光栅（可连续选出不同的波长）来获得高纯度的单色光。　　（为什么要选择物质的吸收峰波长作为工作波长？）f)常用生化滤光片透射光谱曲线示例：常用标准生化滤光片的主要波长有：340,380,405,450,480,492,505,510,546,578,620,630,700nm等；中心波长误差为：±1-3nm,半波宽度在6～12nm左右，最高透过率30%～60%（可视需

8、要而选定）。1.3．朗伯-比耳定律：如果不把吸光度和浓度建立起量的联系，仅有吸光度则没有任何临床意义。朗伯-比耳定律的创立，解决了吸光度与浓度量的内在联系，该定律是光谱化学分析的理论基础。朗伯-比耳定律（光的吸收定律）：在一定条件下，