香附总黄酮的超声波提取工艺研究论文

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1、香附总黄酮的超声波提取工艺研究论文黄锁义罗建华张丽丹蒙春越刘娇冯玲张炜志【摘要】目的探讨香附总黄酮的提取及鉴别方法，以充分利用香附植物资源，避免资源的浪费。方法采用超声波乙醇浸提法从香附中提取黄酮类物质，对所提取的黄酮类物质进行验证，并用分光光度法测定含量。结果测得样品中总黄酮的含量C=0.1864mg/ml，回收率为102.7%，其纯度和产率均较高。结论该方法采用全物理过程，无任何污染.freelethodsofextractionandidentificationfortotalflavonoidsfromCrperusrotundus.Me

2、thodsTheflavonoidsCyperusrotundusbyultrasonicetryinetheflavanoneofCyperusrotundus.ResultBythismethodthecontentofthetotalflavanoneofCyperusrotundusg/mlandtherateofrecoveryethodsforthetotalflavanoidsandthepurityishigh.ConclusionThismethodisapurelyphysicalprocessandhasnopollutio

3、n.Itisanidealent;Cyperusrotundus;Totalflavanone;Identification香附，异名雀头香、莎草根等，为莎草科植物莎草CyperusrotundusL．的干燥根茎。秋季采挖，去毛须。归肝、脾、三焦经，有行气解郁、调经止痛之功效。用于肝郁气滞，月经不调［1］。香附目前尚无家种，商品全系野生，资源分布全国除黑龙江、内蒙古、宁夏、新疆及西藏等省、自治区外的各地区，各地田野及阴湿地均常见生长，尤其以海南货量大且质优，产量约占全国总产量的2/3［2］。香附用途十分广泛，妇科称其为“圣药”。李时珍《本草纲目》

4、指出：“诸书皆云益气,.freell95%乙醇，超声波提取2.5h，抽滤。滤渣再加80ml95%乙醇，超声波提取2.5h，抽滤，合并两次滤液，减压回收乙醇至滤液仅剩25ml左右为止，放置250ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，得样品液。2.2测定方法依据以芦丁为对照品测定香附中总黄酮的含量，加入铝离子试剂，同时控制适宜pH值，使黄酮化合物与铝盐形成络合物，在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。2.3定量实验-总黄酮的含量测定2.3.1波长的选择取样品液适量，在0.30ml5%亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下，经硝酸铝显色后，以试剂为空白参比液在420

5、～700nm波长范围测定络合物的吸光度，络合物于510nm波长处有最大吸收，故测定时选用此波长。2.3.2标准曲线的绘制分别精密吸取芦丁对照液（0.10mg/ml）0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml于10.00ml容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.30ml，摇匀，静置6min；再加10%硝酸铝溶液0.30ml，摇匀，静置6min；再加4%氢氧化钠溶液4.00ml，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，静置12min，以试剂作空白参比液，于510nm处测吸光度。结果见表1。表1分光光度法测定芦丁对照液吸光度结果（略

6、）根据上表得回归方程：A=-0.0311+13.5184C，r=0.9999。2.3.3提取物含量的测定精密吸取样品液0.50ml，置10ml容量瓶，按标准曲线的制备方法测定吸光度A=0.0949，根据回归方程：A=-0.0311+13.5184C，计算样品中总黄酮的含量C=0.1864mg/ml。2.3.4回收率实验精密量取样品液2.00ml，加入标准芦丁对照品2.00ml（0.10mg/ml），同前样品测定方法操作测定吸光度，求出回收率为102.7%。2.4定性实验-总黄酮的鉴别2.4.1颜色反应紫外光下呈色反应：取该样品溶液点在滤纸上，在可

7、见光下呈灰黄色，在紫外光下呈灰褐色并有荧光斑点。浓氨水反应：取该样品溶液点在滤纸上，将滤纸在氨水上方熏0.5min，立即在紫外光下观察，呈极明显的黄褐色荧光斑点。三氯化铝反应：取样品溶液点在滤纸上，滴加１％三氯化铝乙醇溶液，吹干。在可见光下呈灰黄色，在紫外光下呈黄色荧光斑点。乙酸镁反应：取样品溶液点在滤纸上，滴加1%乙酸镁甲醇溶液，吹干，紫外光下呈黄色斑点。盐酸-镁粉反应：取乙醇提取液1ml于试管中加镁粉，再加入浓盐酸数滴（1次加入），在泡沫处呈紫红色。2.4.2纸层析取样品溶液10μl点在滤纸上。用正丁醇∶醋酸∶水=4∶1∶5体积比为展开剂，上

8、行展开5h，取出晾干。喷1%氯化铝乙醇溶液。吹干后于紫外光下，可见荧光斑点。3讨论实验结果表明，本实验方法工艺简单，回收率为102.7%