seldi技术分析体外培养不同肝细胞株差异蛋白的表达

《seldi技术分析体外培养不同肝细胞株差异蛋白的表达》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、SELDI技术分析体外培养不同肝细胞株差异蛋白的表达作者：丁守怡，钱冬萌，牟文凤，闫志勇，宋旭霞，王斌【关键词】表面增强激光解吸/离子化/飞行时间质谱；蛋白质陈列分析；肝肿瘤；肿瘤细胞,培养的；差异蛋白　　AnalysisofdifferentprotEinexpressionsindifferentlivercellstrainsinvitrousingSELDI　　【Abstract】AIM:ToexaminethedifferentialexpressionsofprotEInsinhepatomacellline(HepG2),

2、hepatomacelllinetransfectedbyHBV（HepG2.2.15）paredallivercellline(LO2)byusingsurfaceenhancedlaserdesorption/ionizationtimeofflightmassspectrometry(SELDITOFMS),soastoestablishafoundationforfurtherstudyingonthemechanismofhepatomaattheproteinlevel.METHODS:The3typesofcellsabo

3、vementionedployedtodetectthedifferentialexpressionsofproteomesofHepG2,HepG2.2.15andLO2.RESULTS:Niyoneproteinsallivercelllines,inthesegmentsfromMr5000to15000,proteinsintheHepG2andHepG2.2.15shoacells,theother5decreased.NineproteinsinHepG2ethodindetectingthebiologicalmarker

4、sintheearlierperiodofhepatoma.Thismethodisofconvenience,highsensitivity,andgoodreproducibility.Thebiologicaltagsoftissuespecificproteinsa.Thesetagsarealsomeaningfulinscreeningandidentifyingsignalproteinsfromserumandtissuespecimenindifferenttypesofhepatoma.Certainfoundati

5、onhasbeenestablishedinstudyingtheetiopathogenesisofhepatomaatthelevelofproteins,ass;tumorcells,cultured;distinctprotein　　【摘要】目的：运用表面增强激光解吸/离子化/飞行时间质谱(SELDITOFMS)技术,检测体外培养的肝癌细胞株（HepG2）,转染乙肝病毒的肝癌细胞株（HepG2.2.15）与正常肝细胞株（LO2）蛋白质的差异表达，筛选肝细胞癌的标志蛋白，为进一步研究肝癌发病的蛋白质组学机制奠定基础.方法：常规培养

6、上述3种细胞，细胞状态良好时收集细胞，裂解细胞后采用SELDITOFMS技术用r5000~15000区段，与正常肝细胞株比较，有7个蛋白质在两种肝癌细胞中出现明显变化，其中2个蛋白在肝癌细胞中表达量增高，5个蛋白在肝癌细胞中表达量降低；另外两种肝癌细胞株也有其各自的标志蛋白，9个蛋白分子在HepG2表达量增高，10个蛋白分子在HepG2.2.15表达量增高.结论：SELDI蛋白芯片技术检测可作为检测肝癌早期生物标记的方法，它简便，敏感性高，重复性好，本文发现的这些组织特异性蛋白生物标记对肝癌的早期诊断有潜在的应用价值，对我们从血清或组织

7、标本中筛选和鉴定不同型别肝癌细胞之间的标志蛋白有重要意义，从而为从蛋白质水平研究肝癌的发病机制及新的治疗靶位的寻找奠定了一定的基础.　　【关键词】表面增强激光解吸/离子化/飞行时间质谱；蛋白质陈列分析；肝肿瘤；肿瘤细胞，培养的；差异蛋白　　0引言　　原发性肝癌(HCC)在我国是常见的恶性肿瘤之一，其死亡率在部分城市中占恶性肿瘤死因的第二位.每年有11万人死于肝癌，占全世界肝癌死亡人数的45%.肝癌早期没有明显体征，多数病人确诊时已属晚期，难以治愈，死亡率很高.所以，对于肝癌的早期诊断，在无症状的人群中发现早期病例，对控制肝癌的病死率有现

8、实的意义.因此，研究并寻找有价值的预警肝癌的标志物，成为进一步提高肝癌临床治疗水平的关键.任何疾病在出现病理变化之前，细胞内的蛋白质在成分和数量上都会有相应的改变，癌症的发生是一个多基因多阶段多因子的动力学