大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中esbls酶和ampc酶的检测结果分析

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1、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs酶和AmpC酶的检测结果分析【关键词】抗生素;耐药性;检测　　［摘要］目的：了解对头孢菌素类耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs和AmpC酶的分布及其对抗生素的敏感性。方法:利用双纸片协同试验及纸片法确证试验检测ESBLs，三相试验检测AmpC酶，并用纸片扩散试验和微量稀释法测定细菌对抗生素的敏感性。结果:从头孢噻肟耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中检出产ESBLs分别为91.4%和96.7%；产AmpC酶分别为17.1％和10.0％；产SSBL分别为8.6%和6.7％。产酶菌株对三代头孢菌素高度耐药，对环丙沙星、庆大霉素及复方

2、新诺明耐药率较高，对亚安培南敏感，产AmpC酶细菌对含酶抑制剂的复合抗生素高度耐药。结论:产生ESBLs和AmpC酶是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢菌素耐药的重要机制，实验室应对其检测和监测给予足够重视，临床医生也应了解其对抗生素的耐药规律。　　［关键词］抗生素;耐药性;检测　　DetectionofExtendedSpectrumβlactamasesandAmpCβlactamasesfromEscherichiacoliandKlebslellaPneumoniae　　Abstract:ObjectiveToknoicrobialsusceptibilityof

3、extendedspectrumβLactamaseandAmpCβLactamaseproducingEscherichiacoliandKlebsiellapneumoniaepCβLactamaseandextendedspectrumβLactamasesensionaltest，doubledisksynergytestanddiskconfirmatorytestremendedbyNationalmitteeforClinicalLaboratoryStandards．Diskdiffusiontesticrobialsusceptibilitytest

4、，theMICvaluesofAmpCβlactamaseproducingstrainsinedbymicrodilutiontest．ResultsFromEscherichiacoliandKlebsiellapneumoniaeresistanttocefotaxime，extendedspectrumβLactamaseproducerspCβLactamaseproducersaccountedfor17.1%and10.0%,extendedspectrumSSBLproducerspenem．ThEirresistanceratiotociproflo

5、xacin，gentamicinandtrimethoprim/sulfamethoxazolepCβLactamaseproducerspossessedhighresistancetoantibioticsbinedβLactamasesandAmpCβLactamasesarethemostimportantresistancemechanismsofEscherichiacoliandKlebsiellapneumoniaetocephalosporins，muchattentionshouldbepaidtothEIrdetectionandsurveill

6、ance.Theirresistancetoantimicrobialagentsshouldbeknoβlactamases，ESBLs)和AmpC酶［1］。为了解ESBLs和AmpC酶在我院大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中的分布情况，正确理解细菌的不同耐药机制，以选择有效抗生素进行治疗，本试验从临床住院患者分离的头孢噻肟耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中检测ESBLs和AmpC酶，产SSBL酶［2］，报告如下。　　1　材料与方法　　1.1　菌株来源　为我院2005年1月至2005年10月分离的菌株。选择对头孢噻肟耐药的大埃希菌70株，肺炎克雷伯菌30株，菌种鉴定英国ARI

7、S2X细菌鉴定仪。质控菌为大肠埃希菌ATCC25922。　　1.2　药敏纸片及药敏稀释板　试验中所用药敏纸片为OXOID公司产品，抗生素药敏稀释板(PRCM1F)为购自先德公司。ESBLs的检测：采用双纸片协同试验及NCCLS推荐的初筛及确证试验［3］。AmpCβ内酰胺酶的检测：按Coudron等［4,5］方法并加以改进。取头孢西丁纸片抑菌环直径≤18mm的菌株，转种至胰酶大豆消化液中，将生长至对数期的细菌培养物离心后，取沉淀部分的菌细胞经反复冻融(-70℃及37℃水浴变替5次)制备酶的粗提物。按标准药敏纸片扩散法在MullerHinton琼脂平板上