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1、参蛤益肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病大鼠炎症因子的影响论文.freelmatorymediatorsintheaironarydiserse(COPD).Methods60SDratslyintonormalgroup,COPDmodelgroup,JinshuibaocontrolgroupandShengeyifeigroups.TheCOPDmodelokingandinfusinglipopoly-saccharide(LPS).Thelevelofinterleukin-8(IL-8)andtumornecrosisfact
2、orα(TNF-α)inbronchoalveolarlavagefluid(BALF)easuredandthepathologyoftheairentontherats.ResultThelevelsofIL-8andTNF-αinShengeyifeigroupsodelgroup(P0.01),.freelmationintheairmationinaira公司提供,IL-8、TNF-α放免试剂盒由北京科美东雅生物技术有限公司提供,批号050525。放射免疫γ-计数器(SN-682型),中国科学院原子核研究所日环仪器厂产
3、。徕卡2135型石蜡切片机,德国徕卡公司生产。Olympusbxso型显微镜、Olympus20型显微照相设备,日本Olympus光学工业株氏社生产。2实验方法2.1造模及给药大鼠实验前适应性饲养1周,随机分为6组,即正常对照组、COPD模型组、金水宝对照组及参蛤益肺(以下简称参蛤)低、中、高剂量组,每组10只。参照文献2烟熏加LPS造模,除空白组外,余5组各鼠第1、14天用4%水合氯醛(10mL/kg)腹腔注射麻醉后,予气管内注入LPS各200μg/200μL,第2～13、15～28天每日上午在自制烟熏箱(43cm×32cm×
4、24cm)内熏香烟0.5h(每次每箱4支,大前门牌,上海卷烟厂生产,每支含焦油15mg、烟气烟碱量1.1mg)。各组第2～13、15～28天每日下午给予大鼠灌胃处理,参蛤各组用参蛤方悬液分别按0.25、0.5、1g/(kg?d)灌胃,金水宝对照组按0.5g/(kg?d)灌胃,正常组和模型组分别用等量生理盐水灌胃。2.2BALF的收集、检测实验第29天处死大鼠,完整取肺及气管,将静脉套管针插入左主支气管,钳夹右总支气管,用3mL生理盐水灌洗左肺并回收,反复2次,总回收量约为4mL,离心,取上清,保存于-20℃冰箱中待检。用放免法检
5、测BALF中IL-8、TNF-α水平(按试剂盒说明书操作)。2.3病理组织学观察于各鼠右肺中叶取材,浸泡于10%甲醛液中固定12h,经梯度乙醇脱水,二甲苯透明,常规石蜡包埋,切片,苏木精-伊红(HE)染色。镜下观察支气管管腔、黏膜、杯状细胞及肺泡等情况。2.4统计学方法计量资料用x±s表示,各组间均数比较用t检验。3结果3.1各组IL-8、TNF-α水平比较(见表1)表1参蛤益肺胶囊对COPD大鼠BALF中IL-8、TNF-α的影响(略)注：与正常对照组比较,▲▲P0.01；与COPD模型组比较,*P0.05,**P0.01；与
6、金水宝组比较,#P0.05,##P0.01。3.2支气管及肺泡病理组织学观察与正常对照组相比,模型组见明显支气管黏膜水肿变形增厚,管腔变窄,杯状细胞明显增多,管壁见有较多炎性细胞浸润,肺泡壁有断裂、肺泡扩大融合现象,符合慢性支气管炎、阻塞性肺气肿病理学特征。与模型组相比,参蛤治疗组支气管黏膜上皮结构尚正常,无明显水肿变性,有少量杯状细胞增生,管壁各层浸润的炎性细胞相对较少；肺泡壁变薄、断裂、肺泡腔扩大融合的范围和程度较轻,其中参蛤中剂量组减轻程度较为明显。金水宝对照组病理改变减轻程度不明显。4讨论本研究结果表明,COPD大鼠模型
7、BALF中IL-8、TNF-α水平明显高于正常对照组(P0.01),提示该两种细胞因子与COPD气道炎症及其病理改变密切相关。中药复方参蛤益肺胶囊可降低BALF中IL-8、TNF-α水平,表明该药具有一定的抑制COPD气道炎症的作用；气道病理组织学观察也表明,该药能减轻模型大鼠气道炎症及其结构改变。气道慢性非特异性炎症是COPD主要的病理学特征,管腔内炎症特点则以中性粒细胞浸润(PMN)为主,作为PMN的强趋化剂和活化剂,IL-8通过促使PMN脱颗粒、释放弹性蛋白酶和引发PMN的呼吸爆发、释放大量氧自由基等途径造成肺组织损伤3。
8、TNF-α是一种多功能的细胞因子,在COPD气道炎症中,能诱导血管内皮细胞表达粘附分子,导致PMN在炎症部位聚集；能激活巨噬细胞和PMN,使其细胞毒性增加,释放更多的其他细胞因子如IL-8等；能增强PMN的细胞外蛋白分解作用,并能促进炎症反应、血管生成和组织纤维
