夏枯草高效液相色谱指纹图谱的研究论文

《夏枯草高效液相色谱指纹图谱的研究论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、夏枯草高效液相色谱指纹图谱的研究论文.freel，流速为1ml/min。结果：标出10个主要共有峰，方法学考察表明.freelElite色谱工作站；KQ100A型超声波清洗器；电子天平。夏枯草对照药材及齐墩果酸对照品由中国药品生物制品检定所提供。夏枯草药材分别购自各地药材市场和药店，经鉴定为夏枯草药材的干燥果穗。甲醇为色谱纯，其它试剂为分析纯。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱：HypersilC18，4.6*250mm，10μm；流动相：甲醇：水：醋酸（86：14：0.1）；检测波长为208nm；流速为1ml/min。2.2供试品溶液的制备将夏枯

2、草药材择去杂质，60℃恒温干燥，粉碎机粉碎，粉末过40目筛，反复进行，直至药材粉碎全部过筛为止。精密称定夏枯草药材粉末约1g，加入90%甲醇20ml，超声30min，过滤，洗涤，合并滤液和洗液，挥干溶剂，残渣加流动相溶解定容至10.00ml，溶液用微孔滤膜过滤，得夏枯草液，10μl进样。2.3流动相的选择试验过程中，系统比较了不同配比的甲醇水（80：20；84：16；86：14；88：12）和乙腈水（80：20；85：15；90：10）及添加剂的用量。结果表明，以甲醇：水：醋酸（86：14：0.1）为流动相系统效果较佳。2.4检测波长的选择试验

3、采用DAD检测器，在波长190～400nm范围内进行夏枯草样品的吸收情况考察。通过比较各不同保留时间的峰的紫外吸收光谱，得知多数峰的最大吸收在203～210nm范围，少数在230nm附近，综合比较各波长处的色谱图，最终确定208nm作为检测波长。2.5参比峰的选择为消除测定结果的系统误差，选取与其它组份分离较好、峰形对称、保留时间24.617min的色谱峰作为参比峰（经与标准品色谱图谱及紫外吸收图谱对照，得知此组份为齐墩果酸），以便计算夏枯草药材共同特征组份的相对保留时间和相对含量［4］。夏枯草标准药材的色谱图及齐墩果酸标准品色谱图见图1和图2。2

4、.6方法学验证2.6.1精密度试验同一夏枯草样品液，在相同条件下，重复进样5次，得到色谱图，计算保留时间和峰面积的RSD%。结果见表1。2.6.2重现性试验同一夏枯草样品在相同条件下平行提取5份，分别进样，得到色谱图，计算保留时间和峰面积的RSD%。结果见表2。2.6.3稳定性试验同一夏枯草样品液分别于0h、2h、4h、6h、8h、10h、12h、24h进样，计算所得色谱图中各相对应的保留时间和峰面积的RSD%。结果见表3。图1夏枯草标准药材色谱图（略）图2齐墩果酸标准品色谱图（略）表1精密度试验（略）表2重现性试验（略）表3稳定性试验（略）2.7

5、夏枯草HPLC指纹图谱的建立按供试品的制备和检测方法，对31份夏枯草药材分别测定色谱图。比较各夏枯草药材的色谱图，结合各组份峰的紫外吸收特征，确定相同组份峰，计算各组份相对保留时间及相对峰面积。αi=ti/ts，α为相对保留时间，ts为内参峰保留时间，ti为其它组分保留时间。Ar=Ai×100/∑A，Ar为相对面积值，Ai为各组分面积值，ΣA为总峰面积。选取10个主要共有峰为特征峰，其面积和占到总面积的99%以上，建立夏枯草样品药材的HPLC相对保留值指纹图谱。结果见表4，其中αi为31种样品谱图中相同组份的相对保留时间值的平均值。2.8夏枯草HP

6、LC指纹图谱相似度的计算以10批夏枯草对照药材的HPLC图谱为标准，用计算机辅助中药指纹图谱相似度计算软件计算31个夏枯草样品药材的HPLC图谱与对照药材的相似度。结果见表5。表4夏枯草样品药材的HPLC相对保留值指纹图谱（略）表5样品相似度计算结果（略）3讨论对夏枯草的高效液相色谱条件进行了考察，包括流动相的组成、配比等，并依据不同保留时间峰的紫外吸收特征确定检测波长。确定色谱条件为：流动相为甲醇水醋酸（86：14：0.1）；流速为1ml/min；进样量为10μl；检测波长为208nm。在此色谱条件下，基线稳定，各峰得到了较好的分离，峰形、保

7、留时间等也较好。对中药夏枯草的HPLC指纹图谱进行了系统的研究，建立了31种夏枯草样品药材的HPLC相对保留值指纹图谱，并进行了夏枯草样品药材与标准药材相似度的研究。为夏枯草药材的质量控制提供了依据，为建立规范化的夏枯草种植基地提供了有效的质量控制手段。【