牛病毒性腹泻病毒抗体间接elisa检测方法建立及临床血清学调查

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1、摘摘要要牛病毒性腹泻病（BVD），是由牛病毒性腹泻病毒（BVDV）引起的一种疾病，又称黏膜病。牛病毒性腹泻病毒可以感染各个年龄段的牛，在全世界广泛分布。其临床症状主要表现为腹泻，急、慢性黏膜病，持续性感染与免疫耐受，免疫抑制，母畜流产、死胎和畸胎等。急性感染可表现为短暂的腹泻或者肺炎，通常呈群组暴发流行。急性型通常有出血综合症，死亡率高。犊牛感染该病毒通常比较温和且不表现临床症状。由于其能引起繁殖系统病变并能形成持续感染，因而对养牛业有着重要的影响。BVDV与猪瘟病毒（CSFV）、羊边界病病毒（DBV）及部分未分类瘟病毒同

2、属于黄病毒科瘟病毒属，均为单股正链RNA病毒。瘟病毒属成员中的病毒过去被认为是宿主特异性的，但后来的研究表明BVDV与DBV可以感染更广泛的宿主，它们不但可以感染牛和羊，并且可以感染包括猪在内的多种偶蹄类动物。BVD具有特征性的临床症状的较少，在实际生产中常常不易被诊断，加之本病的病死率不高，未能引起人们的足够重视而忽视本病的存在，因此各牛场牛群缺乏系统的监测防制措施，这也是导致我国牛群BVDV感染日益扩大的原因之一。由于BVDV对牛能形成持续性感染，并且其对养牛业危害极大，因此对牛群进行普查，检测其感染情况，淘汰感染个体，成为

3、本病防制的重要环节。BVDV的非结构蛋白NS3在瘟病毒属中非常保守，是一种免疫优势蛋白，在自然感染或者弱毒活疫苗免疫后的动物体内均可检出针对该蛋白的抗体。本实验室筛选出BVDVNS3蛋白中有免疫反应性的重组片段（rBVDV-NS3b）作为包被抗原，建立了一个BVDV抗体检测的间接ELISA方法，与进口同类试剂盒的符合率为91.3%。为了解黑龙江省内BVDV的感染情况，用本实验室建立的BVDVNS3蛋白抗体间接ELISA检测方法对黑龙江省内不同地区的4个奶牛养殖场2006年~2008年的1388份血清样本进行BVDV抗体检测。结果

4、显示4个奶牛养殖场该3年平均BVDV血清阳性率分别为54.66%、57.68%、62.90%，表明在黑龙江省奶牛养殖场中牛病毒性腹泻病毒感染率较高，并且呈逐年上升趋势。关键词牛病毒性腹泻；黏膜病；感染；酶联免疫吸附试验；非结构蛋白；临床应用-I-AbstractEstablishmentofAnIndirectELISAforDetectionofAntibodyAgainstBovineViralDiarrheaVirusandItsClinicalSerologyInvestigationAbstractBVDisadis

5、easecausedbyBVDV,alsoknownasmucosaldisease.Distributionofthevirusisworld-wide.BovineinfectedbyBVDVshoweddiarrhea,acuteandchronicmucosaldiaease,persistentinfectionandimmunotolerance,immunosupression,pregnantcowabortion,deadfetusandabnormalfetus.Acuteinfectionsmayresul

6、tintransientdiarrhoeaorpneumonia,usuallyintheformofgroupoutbreaks.Acuteformsofthediseaseassociatedwithhighmortalityhavealsobeendescribed,often,butnotalways,associatedwithahaemorrhagicsyndrome.However,mostinfectionsintheyoungcalfaremildandgounrecognisedclinically.Thev

7、irusspreadsmainlybycontactamongcattle.Verticaltransmissionplaysanimportantroleinitsepidemiologyandpathogenesis.Calvesinfectedwiththevirusareusuallymildanddonotcomparetheperformanceofclinicalsymptoms.Becauseoftheirreproductivesystemcancausetheformationoflesionsandpers

8、istentinfection,sothecattleindustryhasanimportantimpact.BVDVandclassicalswinefevervirus(CSFV),sheepborderdiseasevirus(DBV)andsomeun