头花蓼总黄酮提取工艺研究论文

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1、头花蓼总黄酮提取工艺研究论文赵新超，白虹，王元书，刘爱芹，李国庆【摘要】目的探讨头花蓼总黄酮最佳提取工艺。方法采用正交实验方法进行优选，紫外分光光度法测定总黄酮含量。结果乙醇浓度对总黄酮的提取有显著影响。结论结合正交实验结果和方差分析，确定12倍量55%乙醇提取3次，1h/次为最佳工艺。【关键词】头花蓼；总黄酮；提取工艺；正交实验Abstract：ObjectiveTooptimizetheconditionsfortheextractionofthetotalflavonoidsofPolygonumcapitatum.MethodsTheoptimumextractionpro

2、cessofthetotalflavonoidsent.ThecontentoftotalflavonoidsinedbyUV-spectrophotometry.ResultsSignificanteffectofalcoholconcentrationisdiscovered.ConclusionTheoptimumextractionprocessisasfollocapitatumes,onehourpertime,.freele12timesamount.Keycapitatum;Totalflavonoids;Extractionprocess;Orthogonalex

3、periment头花蓼.freelcapitatumBuch.-Ham.exD.Don的干燥全草或地上部分，主产于贵州、云南、四川、西藏、广西等省区，具有清热利湿、解毒止痛、和血散瘀、利尿通淋等功效。头花蓼长期以来为民间常用草药，国内外对其化学成分、药理作用研究较少，经文献检索，其主要成分为黄酮类化合物［1，2］，还包括苯甲醛、乙酸、没食子酸、β-谷甾醇等［3］，具有抗菌、降温、利尿等药理活性，临床上主要用于治疗泌尿生殖系统感染和排石［4～9］。关于头花蓼总黄酮的提取工艺研究未见文献报道，我们以总黄酮得率为指标，通过正交实验考察了乙醇浓度、乙醇体积、提取时间和提取次数4个对提取因素

4、的影响，确定了头花蓼总黄酮的最佳提取工艺。1材料与仪器1.1材料与试剂头花蓼，产地贵州，由本所天然药物化学研究室鉴定为蓼科蓼属植物头花蓼PolygonumcapitatumBuch.-Ham.exD.Don的干燥全草，芦丁对照品，由本所天然药物化学研究室杜成林博士提供，实验所用试剂均为AR。1.2仪器梅特勒万分之一电子天平（梅特勒-托利多仪器有限公司），U-3000紫外分光光度计（日立有限公司)。2方法与结果2.1总黄酮含量测定方法2.1.1标准曲线的制备精密称取120℃干燥至恒重的芦丁对照品6.5mg，置25ml量瓶中，加60%乙醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取6.0ml

5、至25ml量瓶中，60%乙醇稀释至刻度，得对照品溶液。精密吸取对照品溶液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml分别置10ml量瓶中，各加0.1mol/ml三氯化铝溶液2ml，1mol/ml醋酸钾溶液3ml，60%乙醇稀释至刻度，摇匀，放置30min，以相应的溶液作空白，在420nm处测定吸收度，以浓度对吸收度作标准曲线，得线性回归方程为：A=33.307C+0.0004，r=0.9998，线性范围：0.0030864～0.030864mg/ml。2.1.2供试品溶液的制备及测定称取一定量头花蓼原药材，石油醚索氏提取8h，取出药材晾干，得脱脂头花蓼。精密称取脱脂头花蓼5g

6、，共9份，按正交实验设计（见表2）回流提取，过滤，合并滤液，浓缩，用60%乙醇转移至50ml容量瓶并稀释至刻度，再精密量取1ml至25ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，滤过，作为样品溶液。精密吸取1ml不同提取条件下的样品溶液至10ml容量瓶中，按“2.1.1”项测定，并用回归方程计算总黄酮含量。2.1.3回收率实验精密吸取一定量的已知黄酮含量的头花蓼提取液，分别加入一定量的芦丁对照品溶液，按上述方法测定总黄酮的含量，平均回收率为98.1%（n=6），RSD为1.07%。2.2正交实验设计以总黄酮得率为考察指标，选择溶媒（乙醇）浓度、溶媒用量、提取时间和提取次数为考察因素，每个

7、因素取3个水平，进行L9(34)正交实验，因素水平见表1。结果见表2。表1头花蓼总黄酮提取因素水平（略）表2L9(34)正交实验结果分析（略）根据以上正交分析结果可知，各考察因素的极差关系为：RA＞RD＞RB＞RC，理论最佳提取工艺为：A1B3C1D3，对于提取效率影响最小者为C项，即提取时间因素影响最小，把C作为空列，作为误差项处理，进行方差分析。结果见表3。表3影响头花蓼总黄酮提取因素方差分析表（略）3讨论由正交实验结果的极差分析可以直观的看出，头花蓼总黄酮的最佳