医学毕业论文na,k-atp酶β1亚基与肿瘤细胞生长相关性

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1、Na+,K+-ATP酶Pl亚基与肿瘤细胞生长相关性姓名:2014年6月25日Na+,K+-ATP酶pi亚基与肿瘤细胞生长相关性作者:熊竹娟林苹张洁王修杰王琪任婧婧杨洪亮王静吴亚英【摘要】[0的]探讨Na+,K+-ATP酶(31亚基(ATP1B1)与肿瘤细胞增殖分化的关系,以及外源性ATP1B1对肿瘤细胞的影响。[方法]采用RT-PCR检测肿瘤细胞株、正常外周血单核细胞中ATP1B1的mRNA水平,以及经脂多糖(LPS)促进细胞增殖、二甲亚砜(DMSO)诱导肿瘤细胞分化后ATP1B1的mRNA水平变化,并观察通过转染技术增加肿瘤细胞屮ATP1B1表达后细胞的生长情况。[结

2、果]肿瘤细胞株中ATP1B1的mRNA水平明显高于正常单核细胞(P<0.05),促进细胞增殖后细胞中ATP1B1的mRNA水平增高(P<0.05),诱导分化后降低(P<0.05),导入外源性ATP1B1使肿瘤细胞增殖明显受抑(P<0.05)。[结论]Na+,K+-ATP酶pi亚基可以成为反映细胞功能状态特别是肿瘤细胞增殖代谢的重要指标,为肿瘤生物治疗的新策略提供重要的实验依据。【关键词】Na+K+-ATP酶pi亚基肿瘤细胞增殖诱导分化Abstract:[Purpose]ToexploretherelationshipbetweenNa+,K+-ATPascpi-Subu

3、nit(ATP1B1)andtumorcellinproliferationanddifferentiation,aswellastheeffectofATP1B1introduction.[Methods]ThelevelsofATP1B1mRNAweredetectedbyRT-PCRinbothoftumorcelllinesandnormalperipheralbloodmonocyte,andthechangingofATP1B1mRNAwereanalyzedintheproliferation-cellsstimulatedbyLPSandthediffe

4、rentiation-cellsinducedbyDMSO.Moreover,survivalofcellstransfectedwithATP1B1wasobserved.[Results]TheexpressionofATP1B1mRNAintumorcellwassignificantlyhigherthanthatofnormalmonocyte(P<0.05).ATP1B1mRNAlevelwasenhancedintumorcelllinesandmonocytesbyLPSstimulation(P<0.05),whilethelevelofATP1B1m

5、RNAofthesecellsweredecreasedbyDMSO-induccddifferentiation(P<0.05).ThegrowthofthetumorcellstransfectedwithATP1B1wasinhibitedobviously(P<0.05).[Conclusion]ATP1B1canbetheindexofcellfunctionalstatus,especiallytumorcellproliferationanddifferentiation.Itwillbecomeanimportantexperimentfoundatio

6、nforthebiotherapyoftumor.Keywords:Na+,K+-ATPasepi-subunit;tumorcell;proliferation;differentiationNa+,K+-ATP酶是一种广泛存在于真核生物细胞上的跨膜转运蛋白,主耍调节细胞内外Na+、K+的平衡,维持细胞的容积和保证细胞内环境的稳定。Na+,K+-ATP酶可能与肿瘤的转移有关,已有将其作为治疗乳腺癌靶点的研宂[l]o有关Na+,K+-ATP酶与细胞功能关系的研究逐渐成为关注热点,目前ot亚基的研究较多,而对Na+,K+-ATP酶的调控亚基——p亚基的研究较少。我们检测了

7、多种细胞的Na+,K+-ATP酶基因表达情况,发现正常外周血单核细胞与肿瘤细胞株间的ATP1B1mRNA表达有着显著的差异性,而细胞增殖和细胞分化后ATP1B1基因表达又有变化,向细胞中导入ATP1B1有着明显的抑制细胞增殖效应。1材料与方法1.1材料与试剂RNA抽提试剂盒购自上海华舜生物技术有限公司,RT-PCR一步法试剂盒及PCR引物自TaKaRa公司购买和合成。ATP1B1真核表达载体ATP1B1-CMV-flag及载体pFLAGCMV-1由R本国立长寿研究巾心巾岛副教授惠赠,人胃腺癌SGC7901细胞、肝癌SMMC7721细胞、肺

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