动医粪便检查法

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时间:2018-12-05

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1、寄生虫卵粪便检查法许多寄生虫的虫卵、卵囊或幼虫可随宿主的粪便排出体外。通过检查粪便,可以确定是否感染寄生虫及其种类和感染强度。粪便检杳在寄生虫病诊断、流行病学调查和驱虫效果评定上均具有重要意义。一、H的及要求1、掌握直接涂片法、漂浮法、沉淀法检查寄生虫卵。2、在光学显微镜下区分虫卵、幼虫或虫体和异物。3、观察常见吸虫卵、绦虫卵、线虫卵等寄生虫虫卵,掌握其一般特征。二、实验内容(一)粪样采集及保存方法1.被检粪样应该是新鲜且未被污染,最好从直肠采取。2.大动物按直肠检查的方法采集;小动物可将食指套上塑料指套,伸入直肠直接钩取粪便。自然排出的粪便,要采収粪堆上部未

2、被污染的部分。3.采取的粪便应装入淸洁的容器内。采集用品最好一次性使用,如多次使用则每次都要清洗,相互不能污染。七采取的粪便应尽快检查,否则,应放在冷暗处或冰箱冷藏箱中保存。当地不能检查需送出或保存时间较长时,可将粪样浸入加温至50〜6CTC、5%〜10%福尔马林中,使其中的虫卵失去活力,但仍保持固有形态,还可以防止微生物的繁殖。(二)直接涂片法(ExaminationofDirectSmears)在清洁的载玻片上滴1-2滴水或1滴甘汕与水的等量混合液(加甘汕的好处是能使标本清晰,并防止过快蒸发变干),其上加少量粪便,川火柴棍儿仔细混匀。再用镊子去掉大的草棍儿

3、和渣子等,之后加盖玻片,置光学显微镜下观察虫卵或幼虫。注意涂片的厚薄以在载玻片的下面垫上有字的纸时,纸上的字迹隐约可见为宜。直接涂片法的优点是简便易行、快速、适合于虫卵量大的粪便检查;缺点是对虫卵含量低的粪便检出率低。因此在实际工作巾,耑多检几片,以提高检出率。检查虫卵时,先用低倍镜顺序查盖玻片下所有部分,发现疑似虫卵物时,再用高倍镜仔细观察。因一般虫卵(特別是线虫卵)色彩较淡,镜检时视野宜稍暗一些(聚光器下移)。U图1-1-1直接涂片法示意另一方法是直接涂片法的改良法叫回旋法。取2〜3g粪样加淸水2〜3倍,充分混匀成悬液。后用玻璃棒搅拌0.5—lmin,使之

4、成回旋运动,在搅拌过程中迅速提起玻璃棒,将棒端附着的液体放于载片上涂开,加上盖片在镜下检查。检查时多取儿滴悬液。该方法的原理是由于回旋搅动的结果,可使玻璃棒端悬液小滴屮附有较多:W:的寄生虫卵或幼虫。(三)漂浮法(MethodInvolvingFlotation)其原理是采用比重高于虫卵的漂浮液,使粪便中的虫卵和粪便渣子分幵而浮于液体表而,然后进行检查。本法对大多数线虫卵、绦虫卵及球虫卵囊均有效;但对吸虫卵、后圆线虫卵和棘头虫卵效果较差。漂浮液通常多采用饱和盐水,方法简便易行。饱和盐水的制备把食盐加入沸水锅P、j,直到食盐不再溶解而出现沉淀为止(1000ml沸

5、水屮加入约400g食盐)。精制盐配制的饱和盐水一般不必过滤,待冷却后即可使用(冷却后的溶液有食盐结晶析出,即为饱和);粗制盐配制的饱和液可用滤纸、纱布或棉花过滤后备用。漂浮方法取新鲜粪便2g放在平皿屮,用镊子或玻璃棒压碎,加入10倍fi的饱和盐水,搅拌混合,用粪筛或纱布过滤到平底管中,使管内粪汁平于管口并稍隆起为好,但不要溢出。静賈30分钟左右,用盖片蘸取后,放于载片上,镜下观察;或用载片蘸取液而后翻转,加盖片后镜检;也可用特制的铁丝圈进行蘸取检查。铁丝圈注意事项漂浮时间约为30分钟左右,时间过短(少于10分钟)漂浮不完全;时间过长(大于1小时)易造成虫卵变形

6、、破裂,难以识别;检查多例粪便时,用铁丝圈薩取一例后,再蘸取另一例时,需先在洒精灯上烧过后再用之,以免相互污染,影响结果的准确性。漂浮液必须饱和,II保存在不低于13°C的情况下,才能保持较高的比重。否则效果难以保证。在使用饱和食盐液漂浮虫卵时,只能把线虫卵及一些虫卵浮上来,而棘头虫卵和吸虫卵却不能浮上来。所以在把通常的漂浮法进行完以后,可将杯屮的上层液体倒掉,再取沉渣进行镜检。除饱和盐水以外,其他一些漂浮液也可用于一些特殊虫卵的检查。如饱和硫酸锌溶液(饱和度为1000ml水屮溶解920g硫酸锌)漂浮力强,检查猪肺丝虫卵效果较好;饱和硫酸镁溶液(饱和度为100

7、0ml水屮溶解440g硫酸镁)多用于结肠小袋纤毛虫包囊的检查;饱和蔗糖溶液(饱和度为1000ml水屮溶解1280g蔗糖)性温和,可适于多种虫卵和卵囊的漂浮。另外,还有一种简笮的漂浮技术.它可以检查含卵S少的粪便(每g粪便少于50个虫卵〉。具体步骤如下:即取3g粪便放于一塑料杯或烧杯内,加进50ml漂浮液后.用玻璃棒搅匀,通过粪筛或双层纱布过滤到另一个杯屮.漂浮10分钟.然后用一试管插在滤液的巾央底部,并迅速提起。把附在上而的液滴滴落在载片上,加上盖片镜检。(四)沉淀法(SedimentationTechnique)其原理是利用虫卵比重比水大的特点,让虫卵在重力

8、的作用下,自然沉于容器底部,然后进行检

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