《兴奋剂检测》ppt课件

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1、兴奋剂检测王怀冲主管药师杭州市红会医院一、兴奋剂概况掉进“尿瓶子”的“体坛精英们”！本·约翰逊1988年汉城奥运会合成类固醇类兰迪斯2006年环法自行车大赛表睾酮和睾丸激素超标马里昂·琼斯2000年悉尼奥运会类固醇孙英杰2005年十运会外源性雄酮“兴奋剂”一词源于英文词dope，原义为“供赛马使用的一种鸦片麻醉混合剂”。兴奋剂是国际上体育界对违禁药物的总称。国际体育组织对兴奋剂的含义作了下述规定：“健康人以特殊的目的，把药物以任何形式摄入体内，或者以不正常的方法应用非正常量的生理物质，这些在比赛中用来提高运动成绩的做法，称之为应用兴奋剂”。兴奋剂概念兴奋剂

2、发展20世纪60年代刺激剂麻醉剂60年代末期合成类固醇促红细胞生长素80年代近几年人体生长激素出现严重的性格变化产生药物依赖性导致细胞和器官功能异常产生过敏反应，损害免疫力引起各种感染（如肝炎和艾滋病）兴奋剂的危害二、兴奋剂分类和方法麻黄素甲基苯丙胺（冰毒）（一）、刺激剂大多数刺激剂的分析测定都是将色谱分离技术与灵敏的检测手段(如光谱法、电分析法)结合起来而进行定量分析。常见苯丙胺类兴奋剂及其药理作用吗啡（二）、麻醉止痛剂杜冷丁麻醉剂的检测主要有高效液相色谱与质谱(HPLC-MS)联用、质谱与质谱(MS-MS)联用、色谱与光谱联用及电分析等方法。（三）、合

3、成类固醇替勃龙甲睾酮色谱与质谱联用，集合了色谱的高效分离能力和质谱的结构鉴定特征。（四）、利尿剂氢氯噻嗪吲达帕胺利尿剂的检测一般要在尿样、血清等成分复杂的实际样品中进行，所以其检测必须先采用色谱、电泳等方法进行有效地分离。导数分光光度法、荧光光谱。（五）、β-阻断剂比索洛尔卡维地洛分光光度法；用HPLC分离，荧光法检测；吸附溶出方波伏安法。大多以激素的形式存在于人体1、人体生长激素（hGH）2、胰岛素3、促红细胞生成素（EPO）4、促性腺素（六）、内源性肽类激素免疫分析法。又称为血液红细胞回输技术，增强血液载氧能力。1988年汉城奥运会正式被国际奥委会列入

4、禁用范围。（七）、血液兴奋剂四、兴奋剂检测过程1967年，用气相色谱法（GC）、薄层色谱法（TLC）进行分离鉴定，使用了4种GC填充柱系统，氢焰离子化检测器，可检出40种兴奋剂。1972年，采用了程序升温方法，并用氮磷检测器检测。1976年，使用气相色谱-质谱联用手段检测甾体。1980年，用毛细管气相色谱法检测，至1984年大体基本定型，并增加了用高效液相色谱法检查几种特定药物及咖啡因定量等工作。近年来，毛细管电泳、免疫测定、GC-MS-MS等技术广泛应用。检测手段进展检测流程图尿检是兴奋剂检测的常规武器，主要针对传统兴奋剂和各种合成代谢类固醇。其优点在于

5、：取样方便对人无损害尿液中的药物浓度高于血液中的药物浓度尿液中的其他干扰少尿样检测分析过程中按药物的化学特征和分析方法将所有药物分成四类，第一类：尿中以游离形式排泄的易挥发性含氮化合物（主要是刺激剂）；第二类：尿中以硫酸或葡萄糖醛酸结合的难挥发性含氮化合物（主要是麻醉止痛剂，β阻滞剂和少数刺激剂）；第三类：化学结构和特性特殊的刺激剂（咖啡因，匹莫林）和利尿剂；第四类：合成类固醇及睾酮。尿样检测尿检不足常规尿检不仅对血红细胞生长素EPO和促生长激素HGH等禁药无能为力，即使对合成代谢类固醇的“变种”——THG等物质也毫无办法。尿样检测血样检测的目的主要是补充

6、尿样分析方法的不足，是针对EPO的一种检测方式。血样检测2000年，悉尼奥运会第一次实施EPO检测计划，把血检列为兴奋剂检测项目，成为奥林匹克反兴奋剂史上的里程碑。该计划将“EPO2000”血检法和法国科学家开发出来的尿检EPO法共同实施，血液和尿样检测同时呈阳性的运动员才会被处罚，而拒绝血检的运动员将被定为与服禁药同罪。血样检测“EPO2000”研究计划是澳大利亚科学家主导的一项国际合作研究。该项研究最终发现，人体内有三种物质可作为服用生长激素后的标靶物。这三种物质的体内含量有特定变化曲线，一旦异常就说明有体外摄取。按照这种检测技术，通过抽取大约10毫升

7、的血样，便可发现运动员三周前是否注射过EPO。法国科学家开发的是一种新型尿检法。通过分析合成EPO与自然EPO电荷上的微小差别，可检测出当事人在3天内是否接受过EPO兴奋剂注射。悉尼奥运会期间，血检可以有效地查出EPO，但对于HGH仍然无能为力。血样检测HGH的作用类似于一种合成代谢类固醇，能够帮助肌肉生长并帮助运动员从训练疲劳中迅速恢复。由于HGH也能自然生成，关键问题就是如何区分人体自然产生的HGH和人工合成的HGH。虽然HGH早在20世纪80年代就被列为违禁药物并被怀疑大量使用，但现有的检测手段却根本无法追寻到它的踪影血样检测2003年10月底，国际

8、奥委会和世界反兴奋剂机构称，已找到检测人工合成HGH的方法，并在雅