微生物学实验复习提纲

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1、微生物学实验复习提纲1.研究微生物学的基本技术有哪些（显微镜技术、无菌技术、纯种分离技术和纯种培养技术）2.光学显微镜又称“复式显微镜”，由哪两部分组成？显微镜的什么最为关键？为什么？答：由机械装置和光学系统组成物镜的性能ii为关键，因为它直接影响着显微镜的分辨率3.汕镜的放大倍数为多少？与其他物镜相比，油镜的使用比较特殊，需在载玻片与镜头间滴加什么？其什么作用？答：10*100需要滴加镜油增加照明亮度和增加显微镜的分辨率4.影响显微镜分辨率的因素有哪些？（光源的波长、物镜的镜口角和镜头M介质的折射率）5.汕镜使用后应怎样处理？镜汕擦拭的正确方法是怎样

2、的？答：用擦镜纸拭去镜头上的镜油，然后川擦镜纸蘸少许二屮苯擦去镜头上残的油迹，最后再用干净的擦镜纸擦去残留的二甲苯6.制造接种环、接种针的金属常用铂或镍，原因是软硬适度，能经受火焰反复灼烧，又易冷却.7.培养皿的包装一般以多少套作一包比较合适？5〜8套。8.灭菌吸管的包装的注意事项：（1）吸管必须干燥:（2）在距乳粗头顶端约0.5cm处，塞一小段约1.5cm长的棉花（不能用脱脂棉）。作用是避兔外界及口中杂菌吸入管内，并防止菌液等吸入口中。9.空的玻璃器皿一般用干热灭函，若用湿热灭幽。则要多用儿层报纸包扎，外面最好加一层牛皮纸或铝箔。10.按种环在用前必

3、须烧灼火蘭，用后也应立即烧灼。11.简单染色的原理是什么？其主要操作步骤是什么？固定的作用是什么？染色过程中应注意哪些环节？答：原理及步骤健实验课本71页。阆定作用：使细胞质凝阆，使细胞阆定在载玻片上12.革兰氏染的原理及步骤是什么？革兰氐染色后的正确结果是什么颜色？答：原理见实验课本82页步骤：初染、媒染、脱色、复染结果颜色：阳性：菌体保持原有的蓝紫色阴性：洗脱后蘭体变为无色，用复染剂染色后乂变为尨染剂颜色13.你认为哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性？其中最关键的环节是什么？答：（1）涂片不宜过厚，以免脱色不完全造成假HI性；（2）脱色，此坏节最

4、关键。脱色不足，阴性歯被误染成阳性飽；脱色过度，阳性歯被误染成阴性飽。（3）菌龄也影响染色结果。如阳性菌培养吋间过长或己死亡及部分菌自行溶解了，会出现明性反应。14.酵母的死细胞和活细胞可通过哪些方式鉴别？答：L、用美蓝液对酵母茼染色后，活细胞为无色，死细胞为蓝色2、平板菌落计数法15.霉菌的直接制片观察法常用什么染色剂？此染液的优点是什么？答：乳酸石碳酸棉蓝染液优点：石碳酸可以杀死歯体及孢子并可以防腐，乳酸可以保持歯体不变形，棉蓝使菌体着色。16.细菌、放线菌、酵母菌和霉菌卩L

5、大类微生物的菌落各有何特点？答：细a菌：湿润、光滑、透明、粘稠、易挑起、

6、质地均匀、菌落各部位的颜色一致等。放线菌：质地致密、丝绒状或冇皱折、干燥，不透明，上覆盖冇不同颜色的干粉（孢子），菌落正反面的颜色常不一致，基内菌丝与培养基结合较紧，难以挑起。酵母菌：菌落与细菌的相仿，比细菌菌落人而且厚，菌落表而湿润、粘稠、易被挑起，其颜色多为乳白色，少数为红色。同吋会散发出悦人的洒香味。霉菌：菌落形态较大，质地疏松，外观干燥，不透明，呈现或紧或松的蛛网状、绒毛状或棉絮状；茼落与培养基的连接紧密，不易挑取，菌落正反面的颜色和边缘与屮心的颜色常不一致等。17.为什么霉菌菌落的屮央与边远、正面与反面在外形、颜色、构造等方面常有明显的差别？

7、放线菌、细菌和酵母菌呢？（理解）18.测量微生物大小的工具是什么？包括哪两部分？功能各是什么？答：显微测微尺，包括目镜测微尺和镜台测微尺，U镜测微尺测最细胞大小，镜台测微尺校正目镜测微尺每格的相对长度1.如何校正0镜测微尺刻度？计算公式？更换不同放大倍数的目镜活物镜吋，是否需要重新校正？答：校正方法、公式见实验课本49页，需要蚕新校正2.培养基按化学成分、物理状态、用途划分可分为哪儿种类型？答：化学成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养S物理状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基用途：基础培养基、鉴别培养基、选择培养基3.实验常川的凝固剂是哪一种

8、？固体培养基、半固体培养基及液体培养基加凝固剂琼脂的量为多少？琼脂在什么温度下溶化？什么温度下凝固？答：常用凝固剂是琼脂，分别为1—2%，0.5%96°C下融化，4(fC凝固4.配制培养基时应遵循哪些原则？配制培养基的一般方法和步骤是什么？配制培养基时不可用铜锅成铁锅，原因是什么？调pH-•般用什么试剂调？配制pH低的琼脂培养基吋，应怎样配制？答：原则：H的明确、昔养协调、理化适宜、经济节约方法：生态模拟、参阅文献、精心设计、试验比较川磷酸缓冲液和碳酸钙做调节剂5.培养基分装吋，液体分装高度以试管的多少为宜，三角瓶的多少为宜？固体分装高度以试管的多少为

9、宜，三角瓶的多少为宜？半固体分装高度以试管的多少为宜？答：液体：试管高度的14,三角瓶的试管