2018高考生物大二轮复习 第01部分 专题07 现代生物科技专题 整合考点21 基因工程和细胞工程学案

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1、整合考点21　基因工程和细胞工程考纲要求考频(全国卷)1.基因工程的诞生Ⅰ5年0考2.基因工程的原理及技术(含PCR)Ⅱ5年7考3.基因工程的应用Ⅱ5年4考4.蛋白质工程Ⅰ5年1考5.植物的组织培养Ⅱ5年4考6.动物的细胞培养与体细胞克隆Ⅰ5年6考7.细胞融合与单克隆抗体Ⅱ5年5考8.动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础Ⅰ5年4考9.胚胎干细胞的移植Ⅰ5年3考10.胚胎工程的应用Ⅱ5年4考11.简述生态工程的原理Ⅱ5年1考12.生态工程的实例Ⅰ5年0考1．理清基因工程3种操作工具的作用与特点限制酶DNA连接酶载体作用切割目的基因和

2、载体拼接DNA片段形成重组DNA分子携带目的基因进入受体细胞作用部位两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键作用特点(条件)(1)识别特定的核苷酸序列；(2)在特定位点上切割DNA分子(1)E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端；(2)T4DNA连接酶能连接黏性末端和平末端(1)能在宿主细胞内稳定存在并大量复制；(2)有一个至多个限制酶切割位点；(3)具有特殊的标记基因2．掌握基因工程的操作步骤(1)目的基因的获取途径：方法具体操作直接分离从自然界已有的物种中分离，如从基因文库中获取人工合成化学合成已知核苷酸序列的较小基因，直接利用

3、DNA合成仪用化学方法合成，不需要模板反转录法以RNA为模板，在逆转录酶作用下人工合成PCR技术扩增目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下延伸(2)基因表达载体的构建——重组质粒的构建：①表达载体的组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因＋复制原点。②启动子和终止子：启动子是RNA聚合酶结合位点，启动转录；终止子是终止转录的位点。③基因表达载体的构建过程(3)将目的基因导入受体细胞：植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法显微注射技术感受态细胞法(用Ca2＋

4、处理)受体细胞受精卵、体细胞受精卵原核细胞(4)目的基因的检测与鉴定：类型步骤检测内容方法结果显示分子检测第一步目的基因是否进入受体细胞DNA分子杂交(DNA和DNA之间)是否成功显示出杂交带第二步目的基因是否转录出mRNA分子杂交技术(DNA和mRNA之间)是否成功显示出杂交带第三步目的基因是否翻译出蛋白质抗原—抗体杂交是否成功显示出杂交带个体水平鉴定做抗虫或抗病的接种实验，以确定是否有抗性以及抗性的程度；基因工程产品与天然产品的功能进行活性比较，以确定功能是否相同3．理清植物细胞工程两大技术4．比较并把握细胞工程的几个流程图细胞工程

5、技术技术过程图示植物组织培养动物细胞培养植物体细胞杂交动物细胞的融合单克隆抗体的制备核移植5．动物细胞培养的特殊条件归纳(1)胰蛋白酶的使用：首先用胰蛋白酶处理动物的器官或组织，以制备单细胞悬液；培养过程中发生接触抑制时，同样需要用胰蛋白酶使细胞分散开。(2)避免杂菌污染的措施：培养液及培养用具灭菌处理；加入一定量的抗生素；定期更换培养液。(3)特殊的营养条件：①液体培养基。②加入动物血清、血浆等。③通入氧气以满足代谢的需要。④通入二氧化碳以维持培养液的pH。6．澄清容易混淆的三种细胞——杂种细胞、重组细胞和杂交细胞(1)杂种细胞：植物

6、体细胞杂交过程中，两种细胞去掉细胞壁之后形成的原生质体融合，融合的原生质体出现细胞壁之后形成的细胞叫杂种细胞。(2)重组细胞：体细胞的细胞核移植到去核卵母细胞之后形成的细胞叫重组细胞。(3)杂交细胞：动物细胞融合形成的细胞常称为杂交细胞。　聚焦基因工程1．(2016·全国卷Ⅲ)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoRI、BamHI和Sau3AI三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoRI、Sau3AI的切点是唯一的)。图(a)图(b)根据基因工程的有关知识，回答下列问题：(1)经Bam

7、HI酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被________酶切后的产物连接，理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图(c)所示。这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有________，不

8、能表达的原因是________________________________________________________________________________________________