黄曲霉毒素m1如何检测

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1、黄曲霉毒素M1如何检测　　黄曲霉毒素M1是一种强致癌物，它一度存在于一些纯牛奶中，引起食品安全隐患的讨论。相比三聚氰胺，黄曲霉素是否更难检测?这里，环凯技术整理出全套的专业检测方法，让乳和乳制品中黄曲霉毒素M1无处遁形。　　检测范围　　牛奶，奶粉，发酵乳，干酪，奶油等乳制品　　检测原理　　黄曲霉毒素M1易溶于极性溶剂，因此均匀基质中的黄曲霉毒素M1可以通过甲醇/水震荡分散提取，对于高脂肪/油含量的样品基质加入正己烷予以脱脂。本方法采用免疫亲和柱净化，荧光检测器测定乳制品中黄曲霉毒素M1。　　设备耗材　　黄曲霉毒素免疫亲和柱　　高效液相装置带荧光检测器　　均质机　　水平

2、振荡器　　SPE转接头及50ml大容量上样器　　分析天平(精度0.02g)　　SPE装置带抽真空系统　　黄曲霉毒素M1标准品　　PBS缓冲溶液：称取1.16gNa2HPO4，0.20gKH2PO4，8gNaCl和0.2gKCl溶于900ml水中，用HCL或NaOH调节pH至7.4，然后定容至1000ml;　　甲醇(色谱纯)　　乙腈(色谱纯)　　正己烷(分析纯)　　样品前处理　　牛奶样品　　1.称取25g(精确至0.01g)混匀的样品，置于50mL具塞离心管中，水浴加热至35℃～37℃，6000r/min下离心10min。收集全部上清液，待净化;　　2.发酵乳(包括固体

3、状、半固体状和带果肉型)　　3.称取25g(精确至0.01g)混匀的样品，用0.5mol/L的NaOH溶液调节pH值至7.4，9500r/min下均质5min，水浴加热至35℃～37℃，6000r/min下离心10min。收集全部上清液，待净化。　　4.乳粉和粉状婴幼儿配方乳制品　　5.称取10g(精确至0.01g)样品置于250mL烧杯中，加入50mL约50℃的水于乳粉中，玻璃棒搅拌均匀。溶解后冷却至室温，移入100mL容量瓶中，水洗烧杯并转移洗涤液，用PBS定容至刻度后装入离心管6000转/分钟下离心15min，混合上清液，取50mL上清液待净化。　　干酪　　食品

4、检测方法：切取均质的样品5g(精确至0.01g)于50mL离心管中，加2mL水和30mL甲醇，9500r/min下匀浆5min，超声提取30min，6000r/min下离心10min。收集上清液并移入250mL分液漏斗中，同时加入30mL正己烷，振摇2min，分层后，弃去正己烷层。重复用正己烷提取2次。提取液减压浓缩至约2mL，转移浓缩液至离心管，烧瓶用甲醇-水溶液(1+4)5mL分2次洗涤并倒入50mL离心管中，加PBS溶液稀释至50mL，6000r/min下离心5min，上清液待净化。　　奶油　　食品检测方法：称取5g(精确至0.01g)试样，置于50mL烧杯中，

5、用20mL正己烷将其溶解并移于250mL具塞锥形瓶中。加20mL水和30mL甲醇，振荡30min后，将全部液体移于分液漏斗中，待分层后，将下层溶液全部移到100mL圆底烧瓶中，旋转蒸发仪减压浓缩至约5mL，加PBS稀释至约50mL，待净化。　　免疫亲和柱净化　　1.将IAC装于固相萃取装置上，接上大体积上样器，10mlPBS溶液活化柱子，流速保持在2–3ml/min，确保上样前柱子保留少量(0.5ml)的PBS溶液，活化液不收集;　　2.将待净化液加入免疫亲和柱，流速不超过5mL/min，不收集流出液;　　3.用约20ml去离子水淋洗柱子，流速不超过5mL/min，抽

6、真空1分钟，不收集流出液;　　4.用1.5ml甲醇洗脱，流速控制在1d/s，收集洗脱液过膜后上机测试。