流感病毒裂解疫苗

《流感病毒裂解疫苗》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、流感病毒裂解疫苗LiuganBingduLiejieYimiaoInfluenzaVaccine（SplitVirion）,Inactivated本品系用世界卫生组织（WHO）推荐的并经国家药品管理部门批准的流感病毒株分别接种鸡胚，经培养、收获病毒液，病毒灭活、纯化、裂解后制成。用于预防本型病毒引起的流行性感冒。1基本要求生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”有关要求。2制造2.1生产用鸡胚毒种传代和制备用鸡胚应来源于SPF鸡群。疫苗生产用鸡胚应来源于封闭式房舍内饲养的健康鸡群，并选用9~11日龄无畸形、血管清晰、活动的鸡胚。2.2

2、毒种2.2.1名称和来源生产用毒种为WHO推荐的甲型和乙型流行性感冒病毒株，经检定证明为WHO当年推荐的病毒株或相似株。2.2.2种子批的建立应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”规定。以WHO推荐并提供的流感毒株代次为基础，传代建立主种子批和工作种子批，至成品疫苗病毒总传代不得超过5代。2.2.3种子批检定主种子批应做以下全面检定，工作种子批应至少进行2.2.3.1-2.2.3.5项检定。2.2.3.1鉴别试验血凝素型别鉴定：应用相应（亚）型流感病毒特异性免疫血清进行血凝抑制试验，结果应证明其抗原性与推荐的病毒株相一致。2.2.3.2病毒滴度应用鸡胚

3、半数感染剂量法（EID50）检查，病毒滴度应不低于6.5LgEID50/ml。2.2.3.3血凝滴度采用血凝法检测，血凝滴度应不低于1：160。2.2.3.4无菌检查依法检查（附录XIIA），应符合规定。2.2.3.5支原体检查依法检查（附录XIIB），应符合规定。2.2.3.6外源性禽白血病病毒检测用相应（亚）型的流感病毒特异性性免疫血清中和病毒后，接种SPF鸡胚细胞，经培养，用酶联免疫法检测培养物，结果应为阴性。2.2.3.7外源性禽腺病毒检测用相应（亚）型的流感病毒特异性性免疫血清中和病毒后，接种SPF鸡胚肝细胞，经培养，分别用适宜的血清学方法检测其

4、培养物中的I型和III型禽腺病毒，结果均应阴性。2.2.4毒种保存冻干毒种应于－20℃以下保存，液体毒种应于－60℃以下保存。2.3单价病毒原液2.3.1病毒接种和培养于鸡胚尿囊腔接种经适当稀释的工作种子批毒种，置33～35oC培养48~72小时。一次未使用完的工作种子批毒种，不得再回冻继续使用。2.3.2病毒收获筛选活鸡胚，置2~8oC一定时间冷胚后，收获尿囊液于容器内。逐容器取样进行尿囊收获液检定。2.3.3尿囊收获液检定2.3.3.1微生物限度检查菌数应小于105CFU/ml，沙门氏菌检测应为阴性（附录XIIG）。2.3.3.2血凝滴度按2.2.3.

5、3项进行，应不低于1：160。2.3.4尿囊收获液合并每个收获容器的含单型流感病毒的尿囊液检定合格后可合并为单价病毒合并液。2.3.5病毒灭活在规定的蛋白质含量范围内进行病毒灭活。单价病毒合并液中加入终浓度不高于0.2mg/ml的甲醛，置适宜的温度下进行病毒灭活，灭活到期后，每个病毒灭活容器应立即取样，分别进行病毒灭活验证试验，并进行细菌内毒素含量测定。（也可在纯化后或纯化过程中加入适宜浓度的甲醛溶液进行病毒灭活）。2.3.6浓缩及纯化2.3.6.1超滤浓缩采用离心或其他适宜的方法，将单价病毒合并液进行澄清后，采用超滤法将病毒液浓缩至适宜蛋白质含量范围。浓

6、缩后的病毒液应取样进行细菌内毒素含量测定。2.3.6.2纯化超滤浓缩后的单价病毒合并液可采用柱色谱法或蔗糖密度区带离心法进行纯化，采用蔗糖密度区带离心法法进行纯化的应用超滤法去除蔗糖。纯化后取样进行蛋白质含量测定。2.3.7病毒裂解应在规定的蛋白质含量范围内进行病毒裂解。将纯化后的单价病毒合并液中加入适宜浓度的裂解剂，在适宜条件下进行病毒裂解。2.3.8裂解后纯化采用柱色谱法或蔗糖密度梯度离心法以及其他适宜的方法进行病毒裂解后的再纯化，采用蔗糖密度区带离心法进行纯化的应用超滤法去除蔗糖。超滤后的病毒液取样进行细菌内毒素含量测定和微生物限度检查，微生物限度检

7、查菌数应小于10CFU/ml。2.3.9除菌过滤纯化后的病毒裂解液经除菌过滤后，并加入适宜浓度的硫柳汞作为防腐剂，即为单价病毒原液。2.3.10单价病毒原液检定按3.1项进行。2.3.11保存于2～8℃保存。2.4半成品2.4.1配制根据各单价病毒原液的血凝素含量，将各型流感病毒按同一血凝素含量进行半成品配制，（血凝素配制量可在30-36ug/ml范围内，每年各型别流感病毒株应按同一血凝素含量进行配制），可补加适宜浓度的硫柳汞作为防腐剂，即为半成品。2.4.2半成品检定按3.2项进行。2.5成品2.5.1分批应符合“生物制品分批规程”规定。2.5.2分装应

8、符合“生物制品分装和冻干规程”规定。2.5.3规格本品为每瓶（支）