产esbls、esbls+ampc酶的肺炎克雷伯菌检出及其耐药性分析_1

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1、从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果产ESBLs、ESBLs+AmpC酶的肺炎克雷伯菌检出及其耐药性分析作者:卜黎红 徐瑞龙 单小云 许健波 朱以军【关键词】肺炎克雷伯菌近年来,随着β-内酰胺类抗生素,尤其是头孢三代类药物的广泛应用,引起产超广谱β-内酰胺酶、AmpCβ-内酰胺酶、ESBLs+AmpC酶等一系列耐药菌株的产生,细菌耐药现象日益严重。为更好地了解我院临床分离菌株中产ES-BLs、ESBLs+AmpC酶肺炎克雷伯菌的检出率及耐药性,对138株肺炎克雷伯菌进行ESBLs、ESBLs+A

2、m-pC酶测定及药敏试验,现将结果报道如下。1材料与方法材料试验菌株138株肺炎克雷伯菌均为我院XX年8月~XX年8月住院及门诊病人感染标本中分离的菌株,根据临床资料去除重复菌株。质控菌株大肠埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC,分别作为产ESBLs阴性和阳性对照菌。细菌鉴定系统及配套的GNI鉴定卡与GNS-120药敏卡为生物梅里埃公司生产。药敏纸片课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创

3、新性的成果头孢替坦、头孢吡肟为英国Oxoid产品,亚胺培南由默沙东公司提供,头孢哌酮/舒巴坦为舒普深公司提供,哌啦西林/他唑巴坦等纸片购自北京天坛药物生物技术开发公司。药敏用培养基Mueller-Hinton琼脂,英国Oxoid产品。方法菌株培养和鉴定细菌分离培养按照《全国临床检验操作规程》进行。用VITEK-AMS专用卡GNI+鉴定。检测VITEK-AMS测定:采用GNS-120专用药敏卡,严格按说明书操作,仪器自动检查其ESBLs4个检测孔,头孢他啶与头孢他啶/克拉维酸,头孢噻肟与头孢噻肟/克拉维酸孔的生长浊度≥50%时,判定为ESBLs阳性。双纸片协同试验及确认试验:将阿莫西林/克拉维

4、酸纸片置Mueller-Hinton平板中央,依次贴上头孢曲松、CAZ、CAZ/CA、ATM、CTX、CTX/CA,其中CRO、CAZ、氨曲南、CTX与AMC距离为18mm,CAZ/CA、CTX/CA与AMC距离为25mm,且CAZ/CA、CTX/CA与其它纸片间距离>24mm。双纸片协同试验结果判断:如在AMC纸片与其周围CRO、CAZ、ATM、CTX任一种纸片处出现协同抑菌视为产超广谱β-内酰胺初筛阳性。课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有

5、先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果确认试验:按NCCLs纸片标准,CAZ、CAZ/CA和CTX、CTX/CA2组抗生素纸片任一组中含CA的纸片和不含CA的纸片菌抑菌圈直径相差≥5mm,即为产ESBLs菌株。产ESBLs+AmpC酶株的检测表型筛选试验参阅文献[1,2]选用IPM、FEP、CAZ/CA、CAZ、CTX/CA、CTX、CTT7种抗生素进行筛选试验。若IPM敏感,而CTT、FEP、CAZ、CAZ/CA、CTX、CTX/CA耐药为产ESBLs+AmpC酶株。扩散协同试验参阅文献[3,4]经表型筛选试验为产ESBLs+AmpC酶株作扩散协同试验,每株菌取两平板

6、,一平板将AMC纸片置Mueller-Hinton平板中央,四周依次贴上CAZ、CTX、ATM、CRO;另一平板将AMC纸片置Mueller-Hinton平板中央,在与AMC纸片距离为15mm、20mm、25mm、30mm处各贴FEP。若AMC与CAZ、CTX、ATM、CRO不协同,但与FEP协同为产ESBLs+AmpC酶株。药敏试验采用纸片扩散,判断标准按NCCLsXX版标准执行。统计分处理采用WHONET5软件。结果.1产ESBLs阳性率及病房分布临床分离株138株,经VITEK课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计

7、。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果GNS-120卡鉴定56株产ESBLs,纸片协同法55株产ESBLs,纸片确认法57株产ESBLs占%。各科室产ESBLs株从高到低依次为:神经外科30株,其中28株为NCU病房,2株为普通病房的同一床位,且时间较近。ICU病房8株,婴儿科5株,其余8株来自外科病房,6株来自

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