shh信号通路调控大鼠mscs分化为神经细胞机制的研究

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1、重庆医科大学博士学位论文Shh信号通路调控大鼠MSCs分化为神经细胞机制的研究姓名：杨琴申请学位级别：博士专业：神经病学指导教师：谢鹏20080501重庆医科大学博士研究生学位论文英文缩写bFGFEGFGFAPFBSDMSOD^伍M／F12D_NAAer陂BSAbpPBSNSCsN“心．2GCNSEMSCsMDALDHGSHSOD。NODABTrislag英汉缩略语名词对照英文全称BasicfibroblastgrowthfactorEpidermalgrowthfactorGlialfibrillaryacidicprote

2、inFetalbovinserumDimethylsulfoxideDulbecco’SmodifiedEagleMedium／Ham’S．F12DeoxynucleieacidAcrylateAmmoniumperoxy-disulfateBovineserulTlalbuminBasepairPhosphate—bufferedsalinNeuralstemcellsMicrotubue-associatedproteinGalactocerebrosideNeuron-specificenolaseMesenchymal

3、stemcellsMalondialdehydeLactatedehydrogenaseGlutathioneHepatocupreinNitricoxideDiaminobe：nzidineTri(hydroxymethyl)aminomethaneMicrogram中文全称碱性成纤维细胞生长因子表皮生长因子胶质纤维酸性蛋白胎牛血清二甲基亚砜Dulbccco’S改良Eagle／F12混合培养基脱氧核糖核酸丙烯酰胺过硫酸胺牛血清白蛋白碱基对磷酸盐缓冲液神经干细胞微管相关蛋白半乳糖脑苷脂神经元特异性烯醇化酶骨髓间质干细胞丙二醛乳

4、酸脱氢酶谷胱甘肽超氧化物岐化酶一氧化氮二甲基联苯胺三羟甲基氨基甲烷微克重庆医科大学博士研究生学位论文山SDSrnRNAPAGEIODKDMicroliterSodiumdodecylsulfateMessengerribonucleicacidPolyacrylamidegelelectrophoresisIntegralopticaldensityKilodalton2微升十二烷基硫酸钠信使核糖核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳积分光密度千道尔顿重庆医科大学研究生学位论文独创性声明．本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作

5、及取得的研究成果．据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他入已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意．申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任．学位论文作者签名：垃拯日期：垄里墨：坐丝学位论文版权使用授权书本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属重庆医科大学．本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名

6、单位为重庆医科大学．学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，可以采用影印、缩印或其他手段保存论文．论文作者签名：指导教师签名：重庆医科大学博士研究生学位论文Shh信号通路调控大鼠MSCs分化为神经细胞机制的研究摘要MSCs是成体干细胞之一，具有多项分化潜能，在体外可被多种诱导剂诱导分化为神经元和胶质细胞。MSCs具有取材方便、增殖能力强、可自体移植、安全、无免疫排斥及符合人文伦理要求等众多自身优势。因此，MSCs可成为细胞移植治疗中枢

7、神经系统损伤和变性疾病理想的种子细胞。但是目前技术难以通过体外诱导分化得到足够的神经细胞数量而限制了其应用。深入研究、阐明MSCs定向诱导分化机制是解决这一问题的关键。Sonichedgehog(Shh)信号通路由Shh、Ptc、Smo及下游的锌指转录因子Gli蛋白等组成。当不存在Shh时，Ptc抑制Smo的活性，从而抑制目标基因的表达；当Shh与Ptc结合时，Smo上的抑制效应被解除，激活状态的Smo引起Gli蛋白进入细胞核，诱导目标基因表达。在多细胞生物胚胎发育过程中，Shh信号通路参与调控细胞的增殖、分化。目前Shh信号

8、通路是否参与MSCs增殖、分化的调控未见文献报道。因此本实验研究Shh信号通路是否参与MSCs诱导分化为神经细胞的调控。第一部分实验采用全骨髓贴壁法体外分离培养大鼠MSCs，并对其本课题由重庆市教委科学基金资助重庆医科大学博士研究生学位论文生物学特性进行研究。得到如下结果：培