口腔扁平苔藓病损中肥大细胞的组织化学及超微结构特点研究

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1、中文摘要前、一言、一口腔扁平苔藓(OralLichenPlanusOLP)是发生于口腔粘膜比较常见的一种慢性炎症性疾病，不易治愈。目前，该病的发病机理尚不清楚，多数学者一致认为OLP是一种T细胞介导的免疫反应。’在OLP的病损组织中肥大细胞有脱颗粒现象，有的学者据此推测肥大细胞(MastCellMC)作为免疫活性细胞可能参与其发、病过程≯t研究发现肥大细胞根据所含酶类不同分为TMC和TCMC两种，组化特染又可分为成熟型和非成熟型两种。本实验通过研究OLP病损组织中成熟型MC与非成熟型MC的构成比，分析OLP病损中非成熟型MC的分布情况；量化检测成熟型与非成熟型MC细胞

2、面积，比较OLP病损中两型MC的面积、颗粒的大小和数量，说明两型MC的区别；观察OLP病损组织中的MC超微结构的变化和颗粒形态表现，以期探讨在OLP病损中MC的功能状态，以及口腔粘膜的MC亚型特征，为进一步研究OLP的发病机理提供实验依据。．材料和仪器实验组：选择OLP患者30例作组化研究，其中随机选择5例做超微结构观察。对照组：选择健康人19例作组化研究，其中随机选择4例做超微结构观察。仪器和药品：LUZEX—F图象分析系统JEOL．JEM一1200EX电镜·】·光学显微镜阿利新蓝藏红HE染色液方法1．标本制作：将对照组19例和实验组30例组织切片(10ttm)行阿

3、利新蓝／藏红染色。将对照组中4例，实验组中5例行电镜标本制作。所有病例均经HE确诊。2．标本观察：(1)、在阿利新蓝／藏红染色标本中，应用光学显微镜检测高倍视野(10x40)下两种亚型MC的分布情况，计算构成比，分析OLP病损组织与正常口腔粘膜的差异。(2)、应用LUZEX—F图像分析系统检测阿利新蓝／藏红染色的组织切片中两亚型MC的面积大小，分析OLP病损组织中两型的差异，同时观察两亚型中颗粒大小和数量及其分布特点。(3)、应用JEM一1200EX电子显微镜，观察口腔粘膜MC所含不同颗粒形态类型、观察MC的细胞核、细胞膜、细胞器等其他超微结构的改变。结果1、在阿利新

4、蓝／藏红染色的切片上肥大细胞的颗粒有两种染色，蓝色者是阿利新蓝阳性的非成熟型MC，红色或紫红色者是藏红阳性的成熟型MC。OLP病损中非成熟型MC与成熟型MC的构成比较正常粘膜组织有明显差异(X2—28．32，P(0．01)，前者比率(76．49o／)比后者比率(23．51％)明显增高，说明有肥大细胞的增生和活化。．2、非成熟型MC的面积比成熟型MC小(t一13．18，P<0．·2‘01)，胞浆中的颗粒较小，数潼较少，颗粒形态模糊，靠逝细胞膜分布，揭示了MC的成熟进程。3、在OLP病损组织中，MC除了有脱颗粒外，还发现有不同程度的缨胞膜溶解、膜的突起有消失、缨胞核与孩膜

5、有分离、线粒体的空泡变性，微丝徽管混乱的自毁现象。4、日腔粘膜的MC颗粒形态套螺旋、电子致密体、扳层、串珠、细颗粒样，同时具有TMC及TCMC的特点。讨论肥大细胞具有种属异质性，郝位昊履性和不同亚型鲢特点。擐据中性鬣自酶的不同分为TCMC和TMC，前者主要分布于皮肤，羼者主要分带予小肠积臃，在电镜下观察颗粒形态，蘸蠢为螺旋、电子密度体和串珠样，后者为板层和细颗粒样，本实验中口腔粘膜的颗越形态具有两型的共嘲表现，说明MC亚型具有黪殊性。OLP病攒组织巾阿利新蓝阳性MC的构成比与藏常口黢粘膜相比具有显著性差异，非成熟型较成熟狴的比率骥显增高，说明在OLP的发瘸过程中，肥大

6、细胞参与活跃，不仅有脱颗粒现象，同时自身也进行黄代谢，在颗粒的化学成分上体现蓉成熟进程。研究中发现，非成熟型MC细胞面积较成熟型小，颗粒小，颗粒数量少，周边分布，特别是非成熟型MC颗粒较模糊不清，为判断区分两型提供了依据。研究中发现OLP病损组织中商细胞骥、缨胞核、翻细胞器的改变，表明有自毁现象，由此推断OLP瘸损初期MC数量可增加，糜烂型和炎症加煎时可减少。组化研究积电镜研究结果一致。根据实验结果作者认同如下观点：MC参与了OLP的发瘸过程，其发癍机理主要是T淋巴细臌被激添释放淋巴因子，局部微环境改变，致使MC也被激活释放介质，导致OLP的发生。·3·结论1、肥大细

7、胞参与了OLP疾病局部的瘸理损窖过程，其中溅大细胞有明显的增生穰活化，进露肥大细胞凑自毁性发展倾向。2、口腔粘膜MC颗粒形态上具有TMC及TCMC特点，说明妇腔粘膜MC艇型具有特殊性。3、非成熟避与成熟型MC相比，具有细胞小，所含颗粒小而少，且颗粒形恣模糊，近膜分布的特点。说明两型MC具有盟显区别。关键词日腔扁平苔藓肥大细胞口腔糍膜藏红阿利新篮·4·UltrastructuralObservationandHistochemicalStudyofMastCellsin0ralLichenPianusPostgraduate：ZhangYingTuto