莱克多巴胺单克隆抗体的制备与初步应用

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1、扬州大学硕士学位论文AAbADIAgBSACLdDaDMSOELISAFCSFDAgGCGC.MShHHPLC(LC)HRPHASIC50IgMKgKLHLC.MSMAbmgnⅡnmlMRL舢0DOPDD溺PBSPBST符号说明锄moptenna11tibodyacc印tabledailyintal【eantigenbovinesen肛nalbumiIlclenbuterolday(1altondimethylsulfoxideerlzyrne—linkedimmunosorbentassayeIlzyme—linkedimmunosorbentassayf’etalc

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3、—maSsspec仃ome仃ymonoclonalantibodyIIlilli伊amnlinuterIlillilitermaximumresidueliIIlitnanomiteropticaldensityoftho·phenylenediamineovaIbuminphosphate-bufreredsalinephosphatebu脏redsalineaddTween·20氨基喋呤抗体日允许摄入量抗原牛血清白蛋白克伦特罗天道尔顿二甲基亚砜酶联免疫吸附试验胎牛血清(美国)食品药物管理局克气相色谱气相色谱一质谱仪小时次黄嘌呤高压液相色谱仪辣根过氧化物酶人血清白蛋白

4、50%阻断作用浓度免疫球蛋白M千克匙孔血蓝蛋白液相色谱质谱联用单克隆抗体毫克分钟毫升最高残留量纳米光密度邻苯二胺鸡卵清白蛋白磷酸盐缓冲液生理盐水洗涤缓冲液6一周守长莱克多巴胺单克隆抗体的制备及初步应用PEGpHrpmSTUBS肛g弘1WHOpolyethyleneglycolhydl.ogenionconcen订ationrotatlOnpermmutcsecondmmidiIlebarbitalbufrercdsalineIIlicrogrammicrolitcr、Ⅳorldhealtho唱锄ization聚乙二醇苯丙氨酸氢离子浓度辕

5、分秒胸腺嘧啶核苷巴比妥缓冲液微克

6、微升世界卫生组织7一扬州大学学位论文原创性声明和版权使用授权书学位论文原创性声明本人声明:所呈交的学位论文是在导师指导下独立进行研究工作所取得的研究成果。除文中已经标明引用的内容外,本论文不包含其他个人或集体已经发表的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名:J毫\宇《签字日期:≥如g年‘月“日学位论文版权使用授权书本人完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子文档,允许论文被查阅和借阅。本人授权扬州大学可以将学位论文的全部或部分内容

7、编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。学位论文作者签名:J司音鬈签字日期:Ⅻg年‘月“日簧“鳓卿周守长莱克多巴胺单克隆抗体的制各及初步应用}两要莱克多巴胺(Ractopamine,Rac)是一种l

8、B2一肾上腺素受体激动剂,最初被用来治疗支气管哮喘病,后来发现该药物还具有促进生长、营养重分配的作用,故被作为饲料添加剂用于畜禽生产。但动物或人直接或间接大量食入该药物时,可能会发生中毒。目前,我国禁止该药物用于养殖业。由于利益

9、驱使,少数不法商人将该药物添加于动物饲料中,给国民健康带来潜在的威胁。本研究旨在制备特异针对Rac的单克隆抗体,并建立直接竞争酶联免疫吸附法(cELISA)用于Rac的残留检测。应用混合酸酐法,将莱克多巴胺分别与匙孔蓝蛋白(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)、鸡血清白蛋白(OVA)以及辣根过氧化物酶(HRP)进行偶联,经紫外光谱扫描确定偶联成功,测定偶联物的蛋白浓度分别为3.6m咖l、6.2m∥ml、4.4m咖1、1.2mg/ml。以Rac.KLH、Rac.BSA为免疫原,Rac.OVA为检测原,应用单克隆抗体技术获得4株稳定分泌单克隆抗体

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