耐大豆疫霉根腐病qtl定位的研究

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1、摘要分子辅助育种是越来越实用的一种育种技术，在育种实践过程中利用分子标记对重要农艺性状进行辅助选抒，能够有效提高育种效率。关于大豆疫霉根腐病质量抗病基因的遗传定位研究已有大量的报导，但定位耐人豆疫霉根腐病数量性状遗传位点(QTLs)的研究却鲜见报导。鉴丁近年来人豆疫霉根腐病数量胜状抗性育种在世界各国得到高度重视，本研究的目的是定位与耐大豆疫霉根腐病相关的QTLs，用来指导大豆疫霉根腐病抗病育种工作。该研究以感病品系OX760和耐病品种Conrad及二者杂交所衍生的62个F2．6重组自交系为材料，调查两个地点和两个年份的疫霉根腐病病害损失率；利用1200条RAPD引物

2、和341对SSR引物对耐大豆疫霉根腐病进行基因定位。在1200条RAPD引物中，清晰可重复的多态性标记为39个，占3．25％；在341对SSR引物中，清晰可重复的多态性标记为45个，山13．2％。本研究利用Mapmaker／EXP3．0b构建了大豆分子遗传连锁图谱，SSR和P．APD分子标记覆盖基因组的总长约3000cM。分子标记间的平均距离为29．7cM。分子标记主要集中在MLGF、MLGN、MLGDlb+w、MLGM四条染色体组上，这四条染色体上共有36个分子标记，占总标记数35．6％。其中标记最密集的两条染色体是MLGF和MLGM．各有10个标记。本研究采用晰

3、aQTLCart(v2．o】软件进行QTL分析，LOD值火于2．0作为QTL存在的闽值．麸发现分属丁MLGDIb+w和MLGM连锁群的4个与耐人豆疫霉根腐病显著相关的分子标记，即：OPLl8·800bp、OPN03．600bp，Satt536和Saa463。其对病害损火率的贡献率为13．34％到22．31％。与4个分子标记相对应的共有3个QTL位点，即：QPRR-1(QOPLl8—800bp)，QPRR-2(QOPN03-600bp)平uQPRR-3(QSatt536．Satt463)。其中QPRR-1和QPRR-2经多重QTL计算．对两年(2000年和2001年)

4、和两点(Woodslee和Weaver)平均总病害损失率的贡献率为44．5％，而QVRR．3对2001年Woodslee试验点病害损失率的贡献率为15．2％。QPRR．1对2000年Woodslee试验点的病害损失率贡献率为21．55％对2000年Wever试验点的病害损失率贡献率为16．71％，对两年(2000年利2001年)及两点(Woodslee和Weaver)平均总病害损失率的贡献率为22．31％。本试验发现数个在人多数生态环境条件下能重复出现的QTt,s，可以作为育种工作中的重点选择指标，用以指导耐大豆疫霉根腐病的分子辅助育种。该研究同时还表明，NTSYS

5、(v2．1Ja)和GGEBIPLOT(V3．4)软件分析方法可以有效地应用于火豆抗病性分子研究中，其中NTSYS(V21la)可以将发现的与耐火豆疫霉根腐病相关的分子标记应用于62个F26重组自交系的分组，正确率达到了95．16％。而GGEBIPLOT(V34)可以直观地表示QTL、株系与地点、年份之间的关系。关键词大豆；SSR标记；RAPD标记：RIL分离群体；遗传剀谱：大豆疫霉根腐病；QTLVMappingQuantitativeTraitLoci(QTL)AffectingTolerancetoPhytophthoraRootRotinSoybeanUsing

6、SimpleSequenceRepeat(SSR)andRandomAmplifiedPolymorphicDNA(RAPD)MarkersAbstractMolelcularbreedingisbecomingmoreandmorepracticaltechnologyforplantbreeding．Theuseofmarkersinplantbreed吨forindirectselectionofimportanttraitsCallfavorablyimpactbreedingefficiency．mpresentobjectiveistoidentifyq

7、uantitativetraitloci(QTLs)onthelinkagegroups，whichareassociatedwiththetolerancetosoybeanphytophthorarootrot(PRR)，ARILpopulationfromacrossbetweenConrad，asoybeancultivartolerancetoPRRdisease,andOX760，abreedlinglinessusceptibletophythomrootrotwasusedinthisexperiment．DNAwasextractedfromF