大蒜茎尖脱毒技术及组织培养研究

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1、1995,10(3):2025华北农学报~AetaAgrieulturreali一Sinieaae助大蒜茎尖脱毒技术及组织培养研究李昌华李小川赵美华赵军良罗春香,(山西省农业科学院蔬菜研究所太原。30031)摘要采5,。,用山西栽培的个地方名蒜茎尖离体培养获得了无病毒蒜种结果表明茎尖大小为..,..020smm。。1gL00lmg~不定芽增殖培养基以B或MS附加~Zm/细胞分裂素和01一/LNAA,效果最佳。根系诱导在原培养基中加人0.Zmg/LNAA,出根率可达90%以上。成苗后于12月份移栽到节能,。,日光温室成活率达90%以上经对脱毒苗形态观察和染色体

2、检测没有发生异常变化,植株生,,。长健壮遗传性稳定产量高关键词大蒜茎尖培养脱毒愈伤组织.。su,大蒜(All’umativmL)在生产上采用鳞茎繁殖病毒极容易通过蒜种积累和传播目前,山西省产蒜区几乎l。大蒜的病毒是遍及全球的严重病害on%的植株都感染病毒病据生产调,,,查和有关资料报道大蒜病毒病的种类较多主要有洋葱黄矮病毒病(OYDV)韭葱黄条病(、、,,LYsv)大蒜潜隐病(GLv)大蒜花叶病毒病(GMv)等其中危害最大的是大蒜花叶病山其。、叶鞘、,次是洋葱黄矮病植株发病后在叶片蒜墓上出现许多退绿斑点和黄褐斑点等严重时,,,,。、。会使叶片卷曲硬而脆植株矮

3、化蒜头退化变小品质下降该病传播媒介有蚜虫白粉虱等1材料和方法Ll供试品种1.1.1紫皮蒜应县小石口大蒜,蒜头大,四六瓣,口味浓辣,休眠期长,耐储存,不易出芽,是山西省出。口换外汇名蒜之一1.1.2白皮蒜永济马铺头蒜,山东苍山蒜。这两种大蒜,蒜头大,瓣数多达10一20瓣,形状,、,。,、。扁长对温度反应敏感易出芽不耐储存蒜夔长是蒜头蒜墓两用蒜LZ培养方法,,,选用优质蒜瓣清洗消毒在无菌条件下置于实体解剖显微镜下剥取带有一片叶原基的,S一、、、,茎尖播种在MS或B附加不同激素(6BAKTNAAIAA)与浓度配比的培养基上置于室1℃、2,,温25士光照000~30

4、0Olx条件下连续光照14~16h培养2一3周长出绿色幼芽转人增,,,殖培养基扩大繁殖增殖2一3代再转移到生根培养基上生根12月中下旬分期分批移栽到。1994一08一19收稿:3期李昌华等大蒜茎尖脱毒技术及组织培养研究,。节能日光温室中成活率达90%一10%L3病毒检测采用生物接种检测法进行病毒检测。将移栽成活的试管苗,先目测确定显症植株,拔掉病,,,株对无病植株多点随机取样分株采集叶片研磨提取汁液分别涂抹于指示植物千日红叶片,,。上再用600目的金钢砂轻轻摩擦月余后观察发病情况2结果与分析2.1剥取茎尖培养脱毒蒜种,。目前世界产蒜国家脱毒蒜种均采用组织培养

5、技术和离体培养茎尖所得我们剥取茎尖时3:;;采用以下种方法¹热处理方法在人为条件下变温培育成苗后剥取其茎尖º直接剥取蒜瓣的茎尖;»剥取田间生长蒜苗的茎尖。结果是3种取材均可获得脱毒蒜种,其中以直接剥取,,,蒜瓣茎尖方便可行不受生长条件和蒜苗大小强弱的影响只要掌握好茎尖剥取大小的标准..。,,,就能获得脱毒蒜种有关资料报道剥取。2一0gmm叨带有2~3片叶原基的茎尖即能得到60%。,0.Zmm、0.4mm只带一片叶原基的茎尖,一80%脱毒频率的苗而我们的试验剥取接,,种在培养基上前者比后者生长慢幼苗显绿时间相差8一10天;如果茎尖不带叶原基进行培,。,196瓶

6、的58,.1。0.4mm养茎尖死亡现象较大经调查8个茎尖有224个死亡占38%茎尖为,。,带一片叶原基时幼芽生长速度快且不易死亡经移栽田间植株用生物检测方法测定脱毒苗,。率占95%茎尖剥取的大小是脱毒频率高低关键技术2.2茎尖成苗培养基筛选,将参试的5个蒜种以皮色和休眠期长短对温度反应敏感与迟钝分为两种类型(应县紫皮,;,、S、,蒜代表迟钝型休眠期长永济白皮蒜代表敏感型休眠期短)接种于LSBMS培养基上不,。加激素诱导试管苗结果列于表1表1培养基对茎尖成苗的影响养参试B5MS品种接茎成苗成苗率接茎成苗成苗率接茎成苗成苗率尖数数(%)尖数数(%)尖数(%).O

7、七口n己.7.J连OQ匕CJ1几乙八JCJbOJ几45394911777..454395.682093891.1,,,,从表1看出两个不同基因型品种接种在3种培养基上都能诱导成苗其成苗率均在。.,,。1。86%以上LS诱导成苗率最高(91%)但所生成的苗细而弱不利再继代分生B培养的试,,.,,、管苗茎粗株健虽然成苗率低一些(866%)但它利于继代增殖切割分生因而选用B为基本培养基。该培养基对不同品种茎尖成苗的诱导虽有差异,但差异不大,成苗率均在80%以。,(敏感型)比应县蒜(迟钝型)生长速度快,。上培养过程中观察到永济蒜幼芽早显绿5~7天2.3不同激素和浓度

8、对茎尖成苗增殖的影响.一、、、、,一么31使用单一激

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