cxcr4基因沉默对宫颈癌细胞体外侵袭转移能力的影响

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1、分类号⋯⋯⋯⋯⋯UDC⋯⋯⋯⋯⋯密级⋯⋯⋯⋯⋯编号⋯⋯⋯⋯⋯十南大学CENTRALSOUTHUNIVERSITY硕士学位论文论文题目：CXCR4基因沉默对宫颈癌细学科、专业：作者姓名：妇产科学盛文指导老师：邓新粮教授中南大学二。一二年五月分类号UDC硕士学位论文密级CXCR4基因沉默对宫颈癌细胞体外侵袭转移能力的影响TheEffectsofCXCR4GeneSilencingonCervixCancerCellsMigrationandInvasion作者姓名：学科专业：学院(系、所)：指导教师：盛文妇产科学湘雅三医院邓新粮教授答辩委员会主席中南大学二0一二年五月原创性声明本人声明，所呈交的

2、学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：烈日期：≯-埠歹月二。日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录

3、到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名丝又导师签名文矽蛹日期：如，x年矿月知El硕士毕业论文中文摘要摘要目的：利用shRNA基因干扰技术干扰宫颈癌Hela和Caski细胞中CXCR4基因的表达，以探讨CXCR4基因在宫颈癌细胞体外侵袭转移过程中的作用及部分机制，为以SDF一1／CXCR4生物轴为靶点的宫颈癌的生物治疗提供理论及实验基础。方法：(1)设计合成CXCR4特异性shRNA，构建靶[甸CXCR4的RNA干扰载体，转染宫颈癌Hela细胞和Caski细胞，用Realtime．PCR和Westernblot实验内源验证CXCR4敲减效率。(2)采用细胞划痕

4、实验及细胞粘附实验检测细胞体外侵袭迁移能力。(3)利用Westemblot技术检测有效转染CXCR4．shRNA的宫颈癌Hela细胞和Caski细胞中姗一9及VEGF-C的蛋白表达情况。结果：(1)成功构建CXCR4．shRNA的pSilencerTM载体并用Puromycin成功筛选出CXCR4．shRNA转染的宫颈癌Hela和Caski细胞的稳定株；通过Realtime．PCR和Westernblot技术内源性验证干扰效率，结果显示CXCR基因沉默后，宫颈癌细胞的的CXCR4一mRNA和蛋白的表达较空白对照组及阴性对照组明显下调(P<0．05)。(2)细胞划痕实验及粘附实验结果表明，CX

5、CR4基因沉默后宫颈癌Hela和Caski细胞的迁移率及粘附率较空白对照组及阴性对照组明显下下降(P<0．05)。(3)Westernblot结果显示CXCR4基因沉默后宫颈癌细胞硕士毕业论文中文摘要MMP一9及VEGF-C表达水平下调(P<0．05)。结论：(1)CXCR4基因在介导宫颈癌细胞体外侵袭迁移方面起着重要作用。(2)CXCR4基因可能通过调控MMP．9及VEGF．C进而促进宫颈癌的侵袭转移。CXCR4是宫颈癌侵袭和转移过程中的重要调控因子，CXCR4及其下游分子有望成为预防和治疗宫颈癌侵袭转移的重要靶点。关键词：宫颈癌，CXCR4，shRNA，基因沉默，肿瘤侵袭转移硕士毕业论文

6、英文摘要ABSTRACTObjective：Toinvestigatetheeffectofchemokingstromalcellderivedfactor(SDF一1)／CXCR4axisontheinvasionandmetastasisofcervixcancer；andtoconstructaCXCR4specificshRNArecombinantplasmidvectorandstudyitsinhibitingeffectoninvasioncapacityinvitroofcervixcancer．Methods：(1)ACXCR4specificrecombinantpl

7、asmidvectorwaspreparedandtransfectedintotheHelacellandcaskicellwithlipofectamine2000．RT-PCRandWesternblotwereusedtodetectthemRNAandproteinexpressionofCXCR4，respectively．(2)Invasioncapabilityinvitroofthecell