γ分泌酶抑制剂阻断notch信号通路对肺腺癌细胞a549增殖的影响

《γ分泌酶抑制剂阻断notch信号通路对肺腺癌细胞a549增殖的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、目录中文摘要…………………………………………………………………………1英文摘要…………………………………………………………………………3引言…………………………………………………………………………51Notch受体各亚型在肺腺癌A549细胞中的表达检测……………91．1前言…………………………………………………………………………91．2材料和试剂…………………………………………………………………101．3方法…………………………………………………………………………111．4结果…………………………………………………………………………191．5讨论………

2、…………………………………………………………………212MW167阻断Notch信号对肺腺癌细胞A549增殖的影响…………………222．1前言…………………………………………………………………………222．2材料和试剂…………………………………………………………………242．3方法…………………………………………………………………………252．4结果…………………………………………………………………………322.5讨论…………………………………………………………………………363结论……………………………………………………………………………37参考文献

3、…………………………………………………………………………38致谢………………………………………………………………………………41附录A英文缩写一览表………………………………………………………42附录B主要试剂配制方法……………………………………………………43附录C个人简介………………………………………………………………46附录D论著……………………………………………………………………47附录E.文献综述…………………………………………………………………54-0-γ分泌酶抑制剂阻断Notch信号通路对肺腺癌细胞A549增殖的影响研究生：范志文指导老师：

4、周敏摘要背景：在全世界，肺癌在恶性肿瘤死因中占第一位。积极研究肺癌的发病机制，寻求新的治疗方法，尤为迫切。近来，Notch信号通路与肺癌之间的关系受到关注。目前，多认为Notch1、Notch3蛋白在非小细胞肺癌组织中表达比较常见，低氧条件下，Notch1信号可促进非小细胞肺癌增殖及存活。肺腺癌是非小细胞肺癌中的一种常见病理类型，Notch1-4各亚型在肺腺癌细胞上的表达情况还不明确，Notch1信号通路在正常氧条件下对肺腺癌细胞增殖是否有影响，有待进一步研究。目的：检测Notch1-4各亚型在肺腺癌细胞A549上的表达情况，并通过γ分泌酶抑制剂MW1

5、67阻断Notch受体蛋白在A549细胞上活化，观察MW167在正常氧条件下对A549细胞增殖的影响。探讨Notch1信号通路在正常氧条件下对肺腺癌A549增殖的影响，围绕Notch1信号通路，为肺腺癌的防治提供理论依据。方法：体外培养人肺腺癌细胞A549，通过Western-blot及RT-PCR方法检测Notch受体各亚型表达情况；在正常氧条件下，不同浓度（5μM、10μM、20μM）MW167处理肺腺癌细胞A549，48小时后，通过Western-blot方法检测Notch1蛋白表达的变化；不同浓度（5μM、10μM、20μM）MW167处理肺腺

6、癌细胞A549，48小时后，通过RT-PCR方法检测Notch信号通路下游基因HES1mRNA表达的变化；不同浓度（5μM、10μM、20μM）MW167处理肺腺癌细胞A549，48小时后，应用MTT法检测MW167对细胞增殖的影响。实验数据应用SPSS17.0统计分析软件处理。结果：通过Western-blot方法及RT-PCR方法证实Notch1-4各亚型在A549细胞均有表达。在正常氧条件下，不同浓度（5μM、10μM、20μM）MW167处理肺腺癌细胞A549，48小时后，各加药组与对照组相比，Notch1蛋白表达升高（P<0.05），随着MW

7、167浓度增加，Notch1蛋白积累增加率没有明显相应增加（r=0.2，P>0.05）；不同浓度（5μM、10μM、20μM）MW167处理肺腺癌细胞A549，48小时后，各加药组与对照组相比，HES1mRNA表达下降（P<0.05），随MW167浓度增加，对HES1mRNA表达的抑制率逐渐增加（r=0.927，P<0.01）；不同浓度（5μM、10μM、-1-20μM）MW167处理肺腺癌细胞A549，48小时后，MTT法检测各加药组吸光度A值比对照组高（P<0.05），随浓度增加，增值率相应增加（r=0.904，p<0.01）。结论：1．Notch

8、受体各亚型在肺腺癌A549细胞中均有表达，为进一步研究Notch信号通路与肺腺癌A549的关系