资源描述：
《rp-hplc法同时测定胸腔积液中多种氨基酸和修饰》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、RP-HPLC法同时测定胸腔积液中多种氨基酸和修饰核苷汤晓东1，王宏2，王丽丽1，刘会君1，潘再法1收稿日期:2013-1-30修订日期:2013-6-20基金项目：浙江省自然科学基金资助项目(M203030，Y4110536)；浙江省公益性技术应用研究(分析测试)项目(2011C37040,2011C37009)；浙江省重点科技创新团队(No.2011R09002-11)；浙江省重中之重学科开放基金(No.200908)作者简介：汤晓东(1988-)，男(汉族)，浙江武义人，在读硕士，研究方向为色谱分析。
2、通讯作者：潘再法(1976-)，男(汉族)，博士，副教授，硕士生导师，主要从事色谱分析和荧光光谱等方面的研究。E-mail:panzaifa@zjut.edu.cn。(1.浙江工业大学，化学工程与材料学院杭州310014；2.浙江省人民医院呼吸内科，杭州310014)摘要：建立了一种同时测定人体胸腔积液中三种氨基酸和三种修饰核苷的液相色谱分析方法。以酪氨酸、2’-脱氧鸟苷、次黄嘌呤核苷、鸟嘌呤核苷、苯丙氨酸、色氨酸6种标准品混合溶液为对象对液相色谱方法进行了优化。液相色谱条件如下：waterssunfire
3、C18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)，以甲醇-10mmol/L醋酸铵缓冲溶液(醋酸调制pH4.6)为流动相进行梯度洗脱，流速1.0mL/min，检测波长为215nm、257nm和278nm。研究结果表明，6种标准品在各自相应的线性范围内线性关系良好，相关系数均大于0.9996；重复测定7次的相对标准偏差在1.53%~2.73%之间；信噪比为3时，检出限(LOD)分别为0.42，0.063，0.0083，0.075，0.50，0.30μmol/L。胸腔积液样品经甲醇去除蛋白质后，取上清液直接进样分析
4、测定，加标回收率在81.5%~110.5%之间。用该法测定了3个肺癌患者和3个肺部感染疾病患者胸腔积液样品中三种氨基酸和三种修饰核苷的含量。结果表明此法简便、快速、稳定，可用于临床和科研工作。关键词:反相高效液相色谱；氨基酸；修饰核苷；胸腔积液中图分类号：O657.7文献标志码：ASimultaneousDeterminationofAminoAcidsandNucleosidesinPleuralEffusionbyRP-HPLCTANGXiao-dong1,WANGHong2,WANGLi-li1,LI
5、UHui-jun1,PANZai-fa1*(1.CollegeofChemicalEngineeringandMaterialsScience,ZhejiangUniversityofTechnology,Hangzhou310014,China;2.Respiratorydepartment,ZhejiangProvincialPeople'sHospital,Hangzhou310014,China)Abstract:AmethodbyHPLCwasdevelopedforthesimultaneous
6、determinationoftyrosine,2’-deoxyguanosine,inosine,guanosine,phenylanine,tryptophaninpleuraleffusion.Amixedsolutionwiththesesixstandardsubstancewasemployedfortheexperimentconditionsoptimizingandtheresultsareasfollowing:usingWaterssunfireC18(4.6mm×250mm,5μm)
7、,methanol-10mmol/Lammoniumacetate(adjustpHto4.6withaceticacid)asthemobilephasewithagradientelutionattherateof1.0mL/minanddetectedatwavelengthof215nm,257nmand278nm.Theresultshowedthatithadgoodlinearrelationshipbetweenchromatographicpeakareaandtheconcentrati
8、onofeachcomponent.Thelinearcorrelationcoefficientofthesesixsubstancewasabove0.9996.Therelativestandarddeviationofsevenparallelinjectionwaslessthan2.73%.Thelimitofdetections(LOD)ofthesesixsubstancewere0.42,0.0
