orexin在大鼠视网膜中的表达及对神经节细胞上l型钙电流的调制

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1、万方数据论文独创性声明,本论文是我个人在导师指导下进行的研究j:作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的声明并表示了谢意。作者签名:论文使用授权声明日期:硷l垒:二g洳本人完全了解复旦大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采用影印,缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此规定。懈虢牲刷一伴吼Ⅻ一瓯万方数据指导小组成员名单:钟咏梅教授复旦大学神经生物学研究所杨雄里教

2、授中国科学院院士复旦大学神经生物学研究所翁史钧副教授复旦大学神经生物学研究所万方数据目录目勇乏⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一1缩略语及符号⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.4一、中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8二、英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..11三、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..14(一)、前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..14(二)、材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.191.免疫细胞化学⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.191.1大鼠神经节细胞的逆行标记⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。191.2免疫细胞化学的振动切片标本制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯191.3免疫细胞化学反应⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯201.4激光共聚焦扫描显微镜⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯212.RT-PCR分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.2l3.Westernblot分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..224.大鼠视网膜薄片标本的膜片钳记录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯234.1大鼠视网膜薄片标本的制

4、作⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯~234.2膜片钳记录的实验装置⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯244.2.1灌流加药系统⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.244.2.2成像系统⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.254.2.3记录系统⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.265.溶液和药品⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯275.1常规溶液⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.,275.1.1免疫荧光组织化学溶液⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯275.1.2细胞外液⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯275.1.3解剖液⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯275.1.4电极内液⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.28万方数据目录5.2实验中所用工具药的配置⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一286.数据分析处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28(--)、实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.321.大鼠视网膜上orexin及其受体的基因表达及蛋白分布⋯⋯⋯⋯⋯一321.1Orexin及其受体在视网膜上的基因表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..321.2Orexin在大鼠视网膜上的分布⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..331.3Orexin受体在大鼠视网膜中的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..3

6、92.Orexin.A对大鼠视网膜GC上L型钙电流的调制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯412.1大鼠视网膜GC上Ba2+介导的L型钙电流的鉴定⋯⋯⋯⋯⋯.412.2Orexin—A对L型钙电流的调制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一432.2.1Orexin-A增大L型钙电流⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯432.2.2Orexin-A对L型钙电流的增强作用具有浓度依赖性⋯⋯432.2.3OXlR介导orexin-A对GC上L型钙电流的增强作用⋯.442.2.4Orexin.A不影响GC的L型钙通道的激活和稳态失活⋯462.3Orexin-A增大L型钙电流的胞内机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一472.3.1G蛋白参与

7、orexin.A增大L型钙电流的作用⋯⋯⋯⋯⋯472.3.2PI.PLC通路参与orexin-A对GC上L型钙电流的增大作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯482.3.3胞内钙库对orexin.A增大L型钙电流的影响⋯⋯⋯⋯⋯492.3.4PKC通路参与orexin-A对L型钙电流的增大作用⋯⋯⋯512.3.5PKA和PKG信号通路不参与orexin.A增大L型钙电流的作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

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