肝素和hs对乳腺癌细胞侵袭和转移能力的影响

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1、分类号R963密级学校代码10367UDC615.1编号学号肝素和HS对乳腺癌细胞侵袭和转移能力的影响EffectofHPandHSontheinvasionandmetastasisofbreastcanercells学位论文蒋志文教授作者姓名指导教师姓名马琳艳刘浩教授申请学位级别硕士学位授予单位蚌埠医学院学科专业药理学研究方向生化药理论文答辩时间2012年5月学位授予日期2012年6月答辩委员会主席：论文评阅人：2012年4月硕士学位论文肝素和HS对乳腺癌细胞侵袭和转移能力的影响论文题目：EffectsofHPandHSont

2、heinvasionandmetastasisofbreastcanercells研究生姓名:马琳艳指导教师:蒋志文教授刘浩教授蚌埠医学院学科专业:药理学研究方向:分子生化药理论文工作时间:2010年5月至2012年3月学位论文原创性声明本人郑重声明：本人所呈交的学位论文是本人在导师指导下独立进行实验研究工作所取得的成果，本论文中不包含其他人已经发表或已经获取得的研究成果。在本论文撰写中所引用其他研究者的研究内容和成果时已在论文中给予特别标注和明确说明。对本论文的实验研究以及论文撰写过程中给予帮助和建议等贡献的其他人士，也已作了致

3、谢说明。本人完全理解本声明的法律责任，以及所涉及的结果将由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日关于学位论文著作权的共享声明根据《中华人民共和国著作权法》和《高等院校知识产权管理条例》，本学位论文，题目：硫酸乙肝素和HS对乳腺癌细胞侵袭和转移能力的影响，是研究生在导师指导下完成的职务作品，得到蚌埠医学院相关部门科室的物质技术和经费支持，因此，本学位论文的著作权由研究生，导师和蚌埠医学院三方共同享有，均享有署名权和使用权等权益；本学位论文成果归属蚌埠医学院。根据国家学位授予条例，学校对本学位论文有使用权，包括保存本学位论文；因教学

4、和科研的目的，保留在图书馆被查阅或借阅；学校可根据国家规定将本学位论文送交国家有部门保留和使用。学校在公布本学位论文的全部或部分内容时，应保障研究生和导师的署名权等权益。研究生和导师在公开发表本学位论文的全部或部分内容时必须保障学校的署名权等权益，即在发表论文时蚌埠医学院及相关部门科室应署名为作者单位。声明人完全理解本声明的法律责任。研究生签名：导师签名：日期：年月日目录一、中文摘要……………………………………………………………………2二、英文摘要………………………………………………….………………5三、论文正文………………………

5、…………………………………………….1、引言……………………………………………………………………72、材料与方法……………………………………………………………93、结果……………………………………………………………………174、讨论……………………………………………………………………315、结论……………………………………………………………………356、参考文献………………………………………………………………367、致谢……………………………………………………………………40四、附录………………………………………………………………

6、…………A、英中文术语缩略语对照表……………………………………………41B、常用试剂配制…………………………………………………………42C、个人简历和综述………………………………………………………471肝素和HS对乳腺癌细胞侵袭和转移能力的影响研究生：马琳艳指导老师：蒋志文教授刘浩教授中文摘要目的：1、研究人正常乳腺上皮细胞（MCF-10A）合成的硫酸乙酰肝素（heparansulfate,HS）和不同分子量肝素（Heparin,HP）对乳腺癌细胞增殖能力的影响。2、研究HPs和HS对乳腺癌细胞侵袭和转移能力的影响。3、探讨HPs

7、和HS对乳腺癌细胞中基质金属蛋白酶（Matrixmetalloproteinases,MMPs）与肝素酶（heparanase，HSPE）表达的影响。4、检测不同乙酰化程度的低分子量肝素（Lowmolecular-weight-heparin,LMWH）对乳腺癌细胞增殖活性的影响。方法：1、提取MCF-10A细胞汇合期培养液中的HS链，以浓度100、200、400、800、-11600mg·L的HS和三种分子量的HPs（UFH（12.5KD）、LMWH-A（<8KD）-1andLMWH-B（3.5～5.5KD））以浓度312.5、

8、625、1250、2500、5000ug·L作用于MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435细胞24、48、72小时后采用MTT比色法，检测细胞活性。并据此实验计算HS和HPs的IC50。2、以乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231、M