冬凌草甲素和熊果酸对多发性骨髓瘤细胞株u266的抗肿瘤作用及其机制

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1、万方数据温州医科大学硕士学位论文论文题目:圣逮堇空塞塑熊墨酸过墨筮丝量壁擅细胞然堕2鱼鱼的擅胜疸佳届拯墓扭剑答辩委员会主席:芒态教握答辩委员会成员:搂丞基数拯昌越数撞论文答辩Et期:.2Q!垒生三旦21旦万方数据温州I医科大学硕士论文目录中英文缩略词汇对照表⋯⋯.⋯⋯.,⋯...⋯⋯..⋯⋯..1中文摘要⋯⋯⋯...⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯..2Abstract.................................................4前言..⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯..⋯....⋯

2、⋯⋯⋯..6第一部分冬凌草甲素和熊果酸对多发性骨髓瘤细胞株U266生长及凋亡的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯..10一、引言⋯.⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯10二、材料与方法⋯..⋯⋯..⋯....⋯⋯⋯⋯⋯.⋯.10(一)材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10(二)方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12三、结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯14四、分析与讨论⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.20五、小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.22第二部分冬凌草甲素和熊果酸对多发性骨髓瘤细胞株U266可能作

3、用机制的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯..23一、引言⋯⋯⋯....⋯⋯..⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯...23二、材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.23(一)材料..⋯.⋯⋯.....⋯....⋯.....⋯⋯.⋯23万方数据温州医科大学硕士论文(二)方法⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯26三、结果⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29四、分析与讨论⋯.⋯⋯.⋯⋯⋯⋯.⋯⋯.⋯⋯⋯33五、小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.35总结与展望⋯.⋯⋯⋯⋯.⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯...37致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯42综述及参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...43在读期问发表论文⋯.⋯⋯.⋯....⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯57独创性说明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.58关于学位论文使用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.58万方数据温州医科大学硕士学位论文中英文缩略词汇对照表1万方数据温州医科大学硕士论文冬凌草甲素和熊果酸对多发性骨髓瘤细胞株U266的抗肿瘤作用及其机制中文摘要目的:1。证明萜类化合物冬凌草甲素(Oridonin,Ori)和熊果酸(UsolicA

5、cid,UA)可以抑制人多发性骨髓瘤(MultipleMyeloma,删)细胞株U266增殖并诱导其发生凋亡。2.进一步对冬凌草甲素和熊果酸发挥抗肿瘤作用的可能机制进行探讨。结合上述两个部分,为多发性骨髓瘤药物治疗方案的探索提供理论依据。方法:设立实验组(浓度梯度组、时间梯度组)和对照组。浓度梯度实验组即用不同浓度冬凌草甲素或熊果酸处理细胞,时间梯度实验组即用药后培养细胞至不同时间点。对照组加入实验组最大浓度ObISO处理。I.CCK-8法检测冬凌草甲素或熊果酸(0、5、10、20、50wnol/L处理细

6、胞O、12、24、48、72h)对U266细胞生长抑制率的影响。2,对细胞行瑞氏染色,光学显微镜下观察冬凌草甲素lO肚mol/L或熊果酸201amol/L处理细胞24h后U266细胞的形态学改变。3.TUNEL细胞凋亡检测法定性检测药物浓度(0、2.5、5、10、20、501.tmol/L)和作用时阔(O、12、24、48、60、72h)对细胞凋亡的影响。4.流式细胞术法进一步验证药物浓度(0、2.5、5、10、20、50wnol/L)和作用时间(12、24、48、72h)对细胞凋亡率的影响。5.实时荧光

7、定量PCR(realtimefluorescencequantitativePCR)方法检测药物对U266细胞中FGFR3一P13K/Akt信号通路相关基因FGFR3、MDM2、BCL2、CCNDl、MYC、P53和BaxmRNA表达水平的影响。6.蛋白印迹(WesternBlot,WB)方法分析药物对U266细胞中FGFR3一P13K/Akt信号通路相关蛋白FGFR3、MDM2、BCL2、CCNDI、C-MYC、P53和Bax的表达水平变化。结果:1.冬凌草甲素和熊果酸能够抑制U266细胞增殖,且该作用

8、呈浓度和时间依赖性,实验组与对照组比较,差异有统计学意义(P

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