猪圆环病毒2型感染影响猪瘟弱毒疫苗免疫效果的机制

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1、河北农业大学硕士学位论文猪圆环病毒2型感染影响猪瘟弱毒疫苗免疫效果的机制姓名：赵丹萍申请学位级别：硕士专业：预防兽医学指导教师：宋勤叶20120526摘要猪圆环病毒2型(PCV2)可导致感染猪的免疫功能抑制，降低疫苗免疫效果。免疫接种是当前我曝预防猪瘟的主要播施，而牦涞中经常出现猪瘟(CSF)疫苗免疫失败现象，成为困扰猪瘟防控的关键因素之一。本研究通过分析CSF弱毒疫茁免疫之前和免疫之后感染PCV2仔猪的体液与细胞免疫应答、外周血NK细胞和T细胞亚群含量以及细胞因子图谱的动态变化，揭示PCV2感染影稍CSF弱毒疫苗免疫效粟的机制。应用MTT法对外周血淋巴细胞(PBLC)增殖活性的检测结果显示，

2、免疫舞初期CSF弱毒疫苗对免疫猪外周血淋巴细胞的增殖能力有轻微的抑制作用，但很快就恢复正常。而PCV2感染导致初次免疫或加强免疫藉7d、14d，PBLC增殖活性低于V组，随后逐渐恢复，表明PCV2感染在短期内使CSF免疫猪PBLC的增殖抑制加剧。通过流式细胞术对外周血中淋巴细胞、NK细胞和T细胞亚群含量的分析结果显示，V—I和l-v组的淋巴缨胞、NK缅脆积T细脆泛群(Yh纲胞、乳细胞、豫细脆、76T缀骢)的平均含量低于V组，其中以V-I组的细胞下降更严重。表明CSF弱毒疫苗免疫前或免疫后感染PCV2均会引起淋巴细胞含量降低。应鬻实时荧光定量PCR(Real-timeFQ-PCR)对PBLC中W

3、N-'／、IL-2、纯4、IL-10、IL-12p40、IL．18等细胞因子mRNA转录水平的测定结果显示，初次免疫后PCV2感染可导致免疫猪PBLC中IL．2、IFN-y、IL-4、IL．10、IL．12p40、IL．18mRNA的转录水平明显降低；加强免疫后可引起磁，lO与IFN-3,和IL-18mRNA的转录阕时上调，毪．2和l王叠mRNA的转录下调。表明CSFV弱毒疫苗免疫前或免疫后感染PCV2均能导致机体细胞因子转录的严重匮乏或紊乱。综合上述研究结果表明，PCV2感染可以导致猪瘟疫苗诱导的体液和细胞免疫应答水平低下；PCV2感染弓

4、起的外瘸盎孛_潍巴缨麓缺乏、缨胞因子的严重匮乏或转录

5、紊乱是造成猪瘟兔疫失败的重要原因。关键词：猪圆环病毒2型；猪瘟弱毒疫苗；抑制；免疫应答：机制蚴9Ⅲ搬掰1¨¨珏琵■l删3㈣4⋯删1删2舢YMechanismofPorcineCircovirusType2InfectionInfluencingImmuneResponsesofClassicalSwineFeverAttenuatedVaccineAuthor：ZhaoDan-pingAdvisor：ProfessorSongQin-yeMajor：PreventiveVeterinaryMedicineAbstractPorcinecircovimstype2(PCV2)cancausein

6、fectedpigletsimmunosuppressionandreduceimmuneeffectofvaccine．Nowinourcountry,vaccinationisthemainmeasuretopreventCSF．Butimmunefailureofclassicalswinefever(CSF)isoftenseenclinically,whichbecomesoneofthetroublesomefactorsagainstCSFprevention．Inthisstudy,humoralandcellularimmuneresponse，contentsofNKcel

7、lsandT-eellsubpopulations，andmRNAlevelsofcytokinesinperipheralbloodlymphocytes(PBLC)ofthepigletsinfectedwithPCV2beforeoraftervaccinationwithCSFvaccinewereanalysedtorevealthemechanismofporcinecircovirustype2infectioninfluencingimmuneresponsesofclassicalswinefeverattenuatedvaccine．Twenty28-day-oldheal

8、thyweaningpigletswererandomlydividedintofourgroupswhichwereGroupV-I，I—V，VandC，fivepigletspergroup．ThepigletsinGroupV-1wereintramuscularlyinjectedwimCSFvaccinetwodaysbeforebeinginoculatedwithPCV2．Group