葡萄脱毒培养与病毒检测技术研究进展

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1、·专题综述·北方园艺2012(04)：174～177葡萄脱毒培养与病毒检测技术研究进展张丽，石磊，甘晓燕h，李苗，陈虞超，宋玉霞(1．林木育种国家工程实验室，北京100083；2．宁夏农业生物技术重点实验室，宁夏银川750002)摘要：葡萄病毒病是影响葡萄质量和产量的重要限制性因素之一。开展脱毒苗的生产，采用高灵敏的病毒检测手段进行监控，是防治葡萄病毒病的有效途径。现对目前生产上主要发生的葡萄病毒病、脱毒培养技术和病毒检测技术进行简要综述，并对当前的研究进展做以展望。关键词：葡萄病毒；脱毒；病毒检测；进展中图分类号：S6

2、63．103．6文献标识码：A文章编号：1001-0009(2012)04一O174～O4葡萄是果树中易感染病毒病的树种之一，具有病毒立高效率、低成本、可操作性强的葡萄种苗脱毒培育体种类多、分布广、危害大等特点[1]。目前，葡萄病毒病已系的建立；三是探索建立准确、灵敏、简单、快速的葡萄增加到2O个属，有55种之多_2]。其中葡萄扇叶病病毒检测方法。(Grapevinefanleafdisease)、葡萄卷叶病(Grapevine1葡萄主要病毒病的研究leafrolldisease)、葡萄斑点病(Grapevineflec

3、kdisease)、葡1．1葡萄扇叶病萄茎痘病(Grapevinestempittingdisease)和葡萄栓皮病葡萄扇叶病是世界上分布最广泛的葡萄病毒病之(Grapevinecorkybarkdisease)是葡萄的主要病害。由于一。病株表现为生长受阻，枝、叶变形，结果时间缩短，可葡萄繁殖主要靠扦插和嫁接，使得病毒长期积累和重复感造成果实产量下降5O～70，严重影响果实品质[4]。近染，并表现为复合侵染和以潜隐性特征存在，甚至是同种年来在葡萄扇叶病的病毒属性的研究方面有了突破性的病毒由于侵染的品种和发病时期不同也表现

4、各异，因而给进展。Ritzenthaler等l5和Serghini等l6完成了葡萄扇叶病毒的识别和诊断带来极大的困难。此外，病毒的侵染源病毒全部核苷酸序列测定。管汉成等口]也通过RT-PCR复杂，传播途径广泛也进一步加大了防治的困难。技术完成扇叶病毒外壳蛋白基因的序列分析。但此病毒多年来，实现无病毒化栽培一直是国内外努力解决在不同株系、不同品种上的症状各有差异，且存在复合侵的问题。脱毒和病毒检测技术是实现无毒化栽培的关染现象，不易从表症上进行病毒鉴定。键。自1964年召开的第一届葡萄病毒病害学术会议以1．2葡萄卷叶病来，

5、葡萄病毒病的工作迅速地开展起来。欧美国家在该葡萄卷叶病是葡萄生产上另一重要的病毒病。病方面的研究工作方面起步较早，在病毒种类的鉴定，病害分布广，发生于葡萄所有种和品种中，具有阶段隐症毒防治措施的制定上都打下了良好的基础。对葡萄病的特点。感染该病毒的病树果穗数量减少，可造成减产毒检测技术的研究也由传统的生物学鉴定，病毒血清学4O左右]。果实成熟期推迟，含糖量大幅度降低。】，抗检测技术，发展到目前广泛应用的分子杂交、双链RNA逆性降低。自1984~1996年，已发现至少有7种病毒与和PCR等高灵敏的分子生物学技术。我国在葡萄

6、病毒卷叶病相关，被称之为卷叶相关病1～7(GLRav_1～GI一病方面起步较晚，从20世纪8O年代中期才开始对葡萄RaV-7)。其中GLRaV-1、GIRaV一3、GLRaV一7可以作为病毒病的探索{。l。目前针对葡萄病毒病的研究主要集卷叶病的的代表。裴光前等ll对我国葡萄主栽区58株中在三方面：一是葡萄主要病毒病的研究；二是探索建表现卷叶病的葡萄上采集休眠枝条进行卷叶病毒EIJSA和RT—PCR检测，不同程度地检测出GLRaV-1、第一作者简介：张丽(1982一)，女，宁夏银川人，硕士，研究实习员，2、3、4、5和7这

7、6种葡萄卷叶病的发生。并通过葡萄卷现主要从事植物生物技术育种研究工作。叶病毒HSP70基因序列构建系统进化树分析6种卷叶责任作者：宋玉霞(1963一)，女，宁夏银川人，硕士，研究员，现主要病毒的进化关系，发现GLRaV一1、3和7可归为一类，从事植物生物技术育种研究工作。基金项目：北京林业大学林木育种国家工程实验室开放课题资助GLRaV-2、4和5可聚一类。项目(FOP2010—6)。1．3葡萄茎痘病收稿日期：2011～12一O8当砧穗组合感染葡萄茎痘病后长势衰退与死亡，产174北方园艺2012(04)：174～177·

8、专题综述·量减少5O以上。病症表现为树皮粗糙、木栓化，木质制而发挥作用的。目前主要的病毒抑制剂有病毒部和树皮形成层分布着纵向突起及凹槽。嫁接愈合差，唑、板蓝根、鸟嘌呤和尿嘧啶类等多种物质，各种抑制剂发芽迟，枝蔓生长缓慢，树体矮化，产量降低。病树树势作用机理也不相同。病毒抑制剂在苹果、马铃薯脱毒中减退，一般不表现症状，