三七总皂苷抑制hela细胞增殖的实验研究

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1、青岛大学硕士学位论文三七总皂苷抑制Hela细胞增殖的实验研究姓名：邹存华申请学位级别：硕士专业：妇产科学指导教师：赵淑萍20120610摘要目的通过检测不同浓度三七总皂苷(Panaxnotognseng，PNS)作用于宫颈癌Hela细胞不同时相细胞增殖情况、mTOR介导的蛋白质翻译信号通路中4E—BPI、S6KI、mTOR蛋白的表达情况及其下游效应分子VEGF蛋白的含量，探讨三七总皂苷(Panaxnotoginsengsaponins，PNS)对宫颈癌Hela细胞增殖的影响及其可能的分子机制，为PNS对宫颈癌治疗的临床应用提供理论依据。方法应用MTT法检测不同浓度(50、100、200

2、、400ug／mL)的PNS作用于Hela细胞不同时相(24h、48h、72h)后的增殖抑制率；荧光素酶报告基因检测技术检测PNS作用Hela细胞24h后细胞中荧光素酶报告基因(Luciferase，LUC)的表达；应用Western-Blot技术检测200Ilg／mLPNS作用于Hela细胞前后4E—BPI、S6KI、mTOR蛋白及其磷酸化水平的变化；应用ELISA技术检测PNS作用于Hela细胞24h前后细胞中VEGF蛋白的含量。结果(1)MTT法检测发现，三七总皂苷对宫颈癌Hela细胞生长增殖具有明显的抑制作用(P均<0．05)，且呈时间和剂量依赖性，在相同浓度的三七总皂苷作用下

3、，随作用时间的延长，对Hela细胞的抑制作用逐渐增强，差别有显著性(P均<0．05)；在同一时间下，三七总皂苷的浓度越高，对宫颈癌Hela细胞的抑制作用越强，差别有显著性(P均<0．05)。(2)荧光素酶报告基因检测结果显示三七总皂苷作用后Hela细胞中荧光素酶报告基因LUC的含量明显低于对照组，差别有显著性(P<0．05)，并且随着PNS浓度增加，Hela细胞中相对光单位值(RLU)越来越低，差异有显著性意义(P均<0．05)。(3)Western—Blot技术检测发现，200Ilg／mL的三七总皂苷作用于Hela细胞最初的2h内，p-S6K1和P-4E-BPI、P—mTOR蛋白表达

4、均减少，而作用于Hela细胞24h后，细胞中总蛋白S6KI、4E-BPI和mTOR的表达也明显降低，差别有显著性(P均

5、临床治疗提供有价值的参考。硕士研究生邹存华(妇产科学)指导教师赵淑萍教授关键词l三七总皂苷；Hela细胞；mTOR信号通路lTheresearchofPanaxnotoginsengsaponinsinhibitingtheproliferationofHelacellAbstraetObjective：Ourstudyexaminedthecellinhibitionratioandtheexpressionlevelsof4E·BPI、S6Kl、roTORandVEGFinHelacell，whichwasstimulatedwithdifferentconcentrationPa

6、naxNotoginsenoside．WealeexpectingthatthisstudywillcontributetoprovethemachinerythatPanaxNotoginsenosidesuppresscervicalcancer,andmaythereforeprovideapotentialtherapyforhumancervicalCanCeLMethods：Inordertofindoutthechangesofcellinhibitionratioandtheexpressionofluciferasereportergene，P—S6K1，p-4E-B

7、PI，P-mTOR,S6K1，mTOR,4E-BP1，VEGFinHelacells，WeanalyzedthedatabyM订experimentandWestern·Blot，luciferasereportergenetechnologyandELISA．Results：(I)MTTexperimentshows：thegrowthofHelacellsweresignificantlyinhibitedbyPanaxnotoginsen