硫链丝菌肽对人喉癌hep-2细胞增殖、侵袭、转移能力的影响及foxm1在其中的作用

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1、重庆医科大学硕士学位论文硫链丝菌肽对人喉癌Hep--2细胞增殖、侵袭、转移能力的影响及FoxM1在其中的作用姓名:林力申请学位级别:硕士专业:耳鼻咽喉科学指导教师:陈鸿雁201205硫链丝菌肽对人喉癌Hep一2细胞增殖、侵袭、转移能力的影响及FoxMl在其中的作用摘要目的(1)硫链丝菌肽(thiostr印ton)对人喉癌Hep.2细胞株增殖、侵袭以及转移能力的影响;(2)FoxMl在硫链丝菌肽(thiostrepton)抑制Hep.2增殖、侵袭及转移中的作用。方法(1)采用MTT法检测硫链丝菌肽

2、作用于Hep一2细胞的增殖抑制率;用流式细胞仪(FCM)检测不同浓度硫链丝菌肽对Hep.2细胞周期动力学的影响;使用TraJlswell小室检测不同浓度硫链丝菌肽对Hep一2细胞体外侵袭及迁移能力的影响。(2)RT-PCR法检测Hep一2细胞中FoxMl的亚型;分别使用免疫细胞化学法、I弭PCR法以及、Ⅳestemblot法检测Hep.2细胞中FoxMl的蛋白表达以及不同浓度硫链丝菌肽作用Hep.2细胞48h后Foxml的mRNA及蛋白表达的变化。结果(1)不同浓度(1uM、2uM、4uM、8u

3、M、12uM、16uM)硫链丝菌肽作用于喉癌Hep.2细胞株48小时后的增殖抑制率分别为5.27%、9.43%、20.25%、41.61%、67.96%、96.95%。浓度为2uM、3uM的硫链丝菌肽作用于H印一2细胞48h后,FCM法测得Hep一2细胞停滞于Gl/GO期(伙O.05),且呈剂量依赖性(尸

4、经免疫细胞化学法、RT-PCR和Westemblot均检测到FoxMl的————————J塑型堂堂堕燮mRNA及蛋白的表达明显降低(尸<0.05)。结论硫链丝菌肽能明确有效的抑制喉癌Hep.2细胞的增殖、侵袭及转移能力,其机制或许是与降低肿瘤细胞中F。xMl的表达有关。关键词硫链丝菌肽,H印.2,FoxMl,细胞增殖,侵袭,转移EFFECToF聊oSTR置PToN0INPROL胍RA.HoN,嗍s10NANDMETAsTAsIsANDTHEoFFOIxMl矾咖P-2CELLL矾EABSTRACT

5、Objec吐ve(1)Toexploremee腩ctofthi。str印t。nonproliferati。n,inVasi。na11dmetastasisinHep.2cellline;(2)T。eXplorethee髓ctofFoxmlinitsway..(1)MTTreductionassaywasusedtoinvestigatetheproliferationinllibitionoftmostr印tononH印.2cellline.ThechangeofcellcycleaRerusi

6、Ilgmiostr印tonwereanalyzedbynowc”ome仃y;Mi野ationaIldinVasiondete删nationswereusedtoex锄inemee虢ctofthlostreptononmeinVasionandmetastasisofHep.2cellline.(2)IUPCRwasusedtolnvestigatemesub邯eofFo)(1111.IIllmunocytochemistry,RT-PCRandWestemblotwasusedtoinvesti

7、gatetheFoxm1expressioninHep一2celllineby觚ostrepton.胁ultsTheproliferationinhibitionrateofthiostreptonontheH印一2celllineaRer48hineachconcentrationgroup(1“M、2肚M、4州、8州、12ILM、16}LM)are(5.27%、9.43%、20.25%、41.61%、67.96%、96.95%1:Hep。2celllinewerekeptatstageG1/

8、GOdosedependen廿yin2uMand3“M铲oup(P

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