金莲花多倍体诱导及鉴定的研究

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1、万方数据分类号：墨33主：l密级：公珏单位代码：学号：10086金莲花多倍体诱导及鉴定的研究ThestudyofpolyploidinductionandappraisalofTrolliuschinensis学位申请人：张凡指导教师：张芹副教授学科专业：园林植物与观赏园艺学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二。一四年六月四日万方数据独创性声明本人声明所早交的学位论文是本人在导师指导‘卜．进行的研究’I：作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得塑兰堡垒些盘鲎或其他教育机构的

2、学位或证j峙而使J_fj过的材料。与我一同jI：作的同忠对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：张f乞签字日期：切，够年、占月j日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解塑皇垦盔些盘鲎有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅雨I借阅。本人授权河皇垦壅些盘堂可以将学位论文的全部缄部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权二婷)学位论文作者签名：≥长／之签字日期：浏争年易月上日学位论文作者毕业后去向：

3、一I：作单位：通讯地址：一名：c缪砀签字日期：≥夕垆∥月r日电话：邮编：万方数据摘要金莲花(TrolliuschinensisBunge．)为毛茛科(Ranunculaeeae)金莲花属(TroHiusL．)多年生宿根草本植物，作为一种药用植物，已经被人们所熟知。对于金莲花的研究国内外尚且较少，国内的研究多数集中在金莲花的药用价值和药用成分的提取和分析上。而金莲花不仅是一种疗效很好的药用植物，也具有极其美丽的花朵，无论是单朵花还是作为群体观赏，其观赏性都很强，非常美丽。因而对于金莲花的研究就具有了双重意义，既有药用价值方面，也有观赏价值方面。本研究旨在通过多倍体诱导提高金

4、莲花的观赏性、抗性及药用成分的含量，对于金莲花的园林应用以及药用生产都具有重要的意义。本研究从河北省承德塞罕坝地区不同居群金莲花的核型入手，利用常规压片法对塞罕坝不同居群金莲花的染色体数目与核型进行了分析。首先确定金莲花的倍性，确定其为二倍体，并且适合进行多倍体诱导处理，然后通过秋水仙素处理手段，结合组织培养，得到多倍体金莲花。其后，从形态学、细胞学及光合效应等方面，对多倍体金莲花与二倍体金莲花进行了比较分析，得出研究结论如下：(1)3个不同居群的金莲花(JLHl0、JLHll和JLHl2)的染色体数目均为16条，为二倍体(2n=2x=16)，其核型公式分别为2n=2x=

5、16=10sm+6st、2n=2x=16=2m+10sm+4st和2n=2x--16=2m-I-6sm-t-8st。三者核型均为“3A”型，其核型不对称系数分别为74．27％、70．70％和73．98％。(2)用秋水仙素处理金莲花萌动的种子，可以得到多倍体金莲花植株，结果表明，秋水仙素的浓度和处理时间具有积累效应，在各种处理时间和处理浓度的组合中以0．1％浓度的秋水仙素处理24h整体效果最好，诱导率为12．67％。但由于诱导具有不定向及不确定性，所有诱导出的植株并非完全纯合，大部分仍以非整倍体或是嵌合体形式存在。经染色体鉴定，诱导共获得多倍体n株，其中四倍体有5株，染色体

6、数为32条。(3)诱导后四倍体植株较之二倍体植株，胚根圆顿、生长缓慢，子叶更加肥大，植株更加健壮，叶柄变粗，叶片长宽增大，叶缘锯齿更加尖锐、更加深刻。叶片外形发生很大变化，表现为叶片颜色更加浓绿，叶片变厚变硬。通过显微镜观察发现，经诱导后金莲花叶片解剖结构发生变化，栅栏组织厚度增加，叶绿体数量增加，气孔变大，气孔保卫细胞长宽都增加，气孔密度变小。(4)经诱导后金莲花叶绿素含量增加，光合作用速率、蒸腾速率显著提高，气孔导度增加，进而胞间C02浓度、叶片表面相对湿度以及叶片表面C02浓度都明显增加。通过生理指标也验证了形态、结构发生改变后产生的具体影响。诱导后的金莲花更加健壮

7、，适应性更强。在测定的一天中二倍体金莲花的光合速率平均值为3．29I．tmol／(m2·s)，四倍体金莲花的光合速率平均值为7．21l上mol／(m2·s)，可见加倍后金莲花的光合速率显著提高了。而气孔导度、胞问C02浓度、蒸腾速率等其他生理万方数据指标也在处理后有明显的提高，表明秋水仙素处理后得到的四倍体金莲花较之没有处理的二倍体金莲花在生理特性方面确实有所改变，抗性也有所提高。关键词：金莲花；核型分析；多倍体诱导；倍性鉴定万方数据ThestudyofpolyploidinductionandappraisalofTroll