荧光寡核苷酸探针识别单核苷酸多态性研究

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4、有繁琐的杂交过程，因此依靠监控目标序列与寡核苷酸探针杂交的探针分析法，是识别单核苷酸多态性最常见的方法。现如今，利用带有标记且己知序列的寡聚核苷酸探针识别单碱基多态性是环境毒理学研究领域的重要课题。在近几十年中，荧光探针的种类在增多，功能在发展，其中2．氨基嘌呤是一种类嘌呤物，其本身具有良好的荧光性，成为被广泛认可的荧光探针之一。本文研究了2．氨基嘌呤在识别单碱基多态性过程中荧光属性的变化，主要包括三部分：(1)环境因素对2一氨基嘌呤荧光强度的影响。改变寡聚核苷酸单链中2．氨基嘌呤两侧相邻碱基的类型和环境温度，形成不同的微环境，检

5、测2一氨基嘌呤在不同微环境中荧光属性的变化。(2)用2．氨基嘌呤探针单链与其对位分别为A、C、G、T四种碱基的互补序列寡聚核苷酸单链杂交，检测2．氨基嘌呤在与对位不同碱基配对时荧光性质的变化，通过分析寻找2．氨基嘌呤荧光特性变化与碱基类型变化之间的关系，从而利用荧光特性的表征达到识别单碱基类型的目的。(3)2一氨基嘌呤探针形成寡核苷酸三链的探索。采用2一氨基嘌呤荧光探针与DNA双链形成三链DNA的方法，作为识别单核苷酸多态性及单碱基突变的途径。关键词：荧光寡核苷酸探针，单核苷酸多态性，2-氨基嘌呤ABSTRACTAsiswidel

6、yknown，pollutantsenteringthehumanbodythroughthefoodchainmayaffecttheDNAmoleculesandcausethesinglenucleotidepolymorphisms(SNPs)．Beingoneofthemostabundantgeneticvariationsinthehumangenome，SNPsarecloselyrelatedtovariousdiseasesanddisorders．TherearemanydetectionmethodsofS

7、NPs，andmostofthemrelyondetectingthehybridizationoftargetsequenceandoligonucleotideprobe．Sincetheprobecanbedirectlyidentifiedandhasnocomplicatedprocessofhybridization，theprobeapplicationhasbeentakenasthemostcommonmethodtodetectSNPS．Nowadays，usingofoligonucleotideprobes

8、淅mmarkedandknownsequencetoidentifysinglenucleotidepolymorphismsisanimportanttopicinthefieldofenvironmentaltoxicology．Inrecen