室内人工饲养中华蜜蜂技术及卵显微注射ecfp基因的研究

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1、英文缩写AmpbpddH20DNAdNTPEBEcoliEDllAECFPgCFPhKbMgS04rainODo．R．FPBSPCRRNASGFPEGFP英文缩略词检索表英文全称AmpicillinBasepairDoubleDistilled腑ferDeoxyribonucleoicacidDeoxyribonucleosideEthidiumBromideEscherichiacoliEthylenedinitriIotetraaceticacidEnhancedcyanfluorescentproteinGrammeCyanfluoresce

2、ntproteinHourKilobasepairMagnesiumsulfateMinuteOpticaldensityOpenreadingframePhosphatebuffersalinePolymerasechainreactionRibonucleieAcidSecondGreenfluorescentproteinEnhancedgreenfluorescentprotein中文注释氨苄青霉素碱基对双蒸水脱氧核糖核苷酸脱氧核糖核苷三磷酸溴化乙锭大肠杆菌乙烯二胺四乙酸增强型蓝色荧光蛋白克蓝色荧光蛋白小时千碱基对硫酸镁分钟光密度开放阅读框

3、磷酸盐缓冲液聚合酶链氏反应核糖核酸秒绿色荧光蛋白增强型绿色荧光蛋白关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立进行科学研究所取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体，均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定，同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。保密论文

4、在解密后应遵守此规定。论文作者签名：导师签名：日期：赴辎山东农业大学硕士学位论文(2008)1．中华蜜蜂资源及特性引言蜜蜂具有世代周期短、繁殖率高、后代个体数多、能大量饲养、易获得大量性状一致、发育同步的群体等特点，是理想的实验动物研究模型，国际上把它作为继果蝇、拟南芥之后的第三种模式生物(Robinson，2005：Pageetai．，2002)。中华蜜蜂(ApJsceranaFabrwjus)是东方蜜蜂的指名亚种，简称中蜂(匡邦郁等，2000)。中国绝大部分地区都有中蜂分布，但主要集中在长江流域和华南各省山区(曾志将，2003；袁国宝等，199

5、7)。一群蜜蜂通常由一只蜂王、大批工蜂和少量的雄蜂组成。一般说来，中蜂蜂王体长14---19mm，体色有黑色和棕红色两种，全身覆盖黑色和深黄色混合短绒毛。一群蜂只有一个蜂王，中蜂蜂王个体比工蜂大1／4，产卵蜂王体长18"-22ram，体重250mg左右；蜂王寿命为3"--5年，最长的可达8---9年(王静等，200&曾志将等，2003)。雄蜂体长1l～14mm，体色黑或黑棕色，全身披灰色短绒毛。工蜂是生殖器官发育不完全者，体长10～13mm，吻长4．5～5．6mm，体色变化较大(hmdameta1．，2006)。蜂王是蜂群遗传物质的传递者，又是蜂群

6、行为的主控者，它主要是通过激素来调控蜂群(Krauscta1．，2004；Keelingeta1．，2003；胡福良等，2004)。蜜蜂性别由基因csd决定，一该基因结构与双翅目昆虫的tra基因相似(Beyeeta1．，2003；Santomauroeta1．，2004)。当性等位基因纯合子时会形成二倍体雄蜂，不过二倍体雄蜂在卵孵化后很快就会被工蜂识别而杀死(Chaud，1997；Herrmanneta1．，2005)。蜜蜂雌性分化有两种不同级型：蜂王与工蜂。雌性蜜蜂级型分化发生在第三日龄，由工蜂饲喂的食物和发育的巢房决定。蜂王幼虫在发育过程中一直

7、饲喂蜂王浆(Kamakuraeta1．，2005)，进而启动蜂王基因发育成蜂王。受精卵孵化的幼虫饲喂三天蜂王浆后，改食花粉蜂蜜组成的日粮，则发育成工蜂(Omholteta1．，2004)。一群蜂通常10000"--30000只工蜂，在繁殖旺季，一个强群中工蜂的数量能达到5万～5室内人工饲养中华蜜蜂技术及卵显微注射ECFP堆I★J的研究6万只(曾志将等，2003；Winston，1987)。蜜蜂具有清理行为，中蜂也不例外。蜜蜂对发育不正常幼虫或姐妹蜂有惊人的判断能力。护理蜂(Guiduglieta1．，2005)日同检查巢房，通过不断插入头和胸部到巢

8、房检测卵是否正常。据报道蜜蜂可能是根据卵表面的一些物质来判断，蜂王产的卵表面上有比工蜂产的卵更复杂的烃类物质，蜂王产的卵表