血链球菌胞内蛋白与胞外蛋白对中间普氏菌与牙龈卟啉单胞菌生物膜作用的研究

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1、单位代码：10222学号：09833044分类号：佳木斯大学口腔医学硕士专业学位论文论文题目：血链球菌胞内蛋白与胞外蛋白对中间普氏菌与牙龈卟啉单胞菌生物膜作用的研究研究生姓名：王丹学科、专业：口腔临床医学导师姓名、职称：马晟利主任医师论文答辩日期：2012年6月2日佳木斯大学硕士学位论文论文题目：血链球菌胞内蛋白与胞外蛋白对中间普氏菌与牙龈卟啉单胞菌生物膜作用的研究研究生：王丹专业：口腔临床医学指导教师：马晟利单位：黑龙江省医院协助指导教师：单位：单位：单位：学习期限：2009年9月至2012年7月学位授予单位：佳木斯大学学术诚信承诺本人郑重声明：所呈交的论文是我个人

2、在导师指导下进行的研究工作及取得研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得佳木斯大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。签名：___________日期：____________关于论文使用授权的说明本人完全了解佳木斯大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。（保密的论文在解密后应遵循此规定

3、）签名：___________导师签名：___________日期：____________目录一、中文摘要1二、英文摘要2三、前言3四、文献综述4五、材料与方法16六、结果22七、讨论25八、结论29九、参考文献30十、致谢35十一、英文缩写36十二、攻读学位期间发表的论文37十三、附图38佳木斯大学硕士学位论文摘要目的：提取血链球菌(Streptococcussanguis，S.sanguis)胞内蛋白与胞外蛋白，研究两者分别对牙周可疑致病菌中间普氏菌（Prevotellaintermedia，P.intermedia）与牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas

4、gingivalis，P.gingivalis）及两者混合培养后形成的生物膜的作用。方法：1.血链球菌细胞外蛋白的提取：通过低温超速离心，有机溶剂萃取法提取血链球菌胞外蛋白。2.血链球菌细胞内蛋白的提取：通过超声破碎，硫酸铵盐析，SephadexG-25除盐及透析的方法提取血链球菌胞内蛋白。3.观察血链球菌胞内蛋白与胞外蛋白分别对中间普氏菌，牙龈卟啉单胞菌及混合培养后两种细菌的作用。4.以激光共聚焦扫描电镜观察血链球菌胞内蛋白与胞外蛋白分别对混合培养的中间普氏菌及牙龈卟啉单胞菌形成的生物膜作用。结果：1.血链球菌胞内蛋白对混合培养的中间普氏菌与牙龈卟啉单胞菌的生长有明

5、显抑制作用，其最小抑菌浓度为0.125g/L；血链球菌胞外蛋白对中间普氏菌与牙龈卟啉单胞菌未见抑菌作用。2.混合培养的中间普氏菌与牙龈卟啉单胞菌形成的生物膜在血链球菌胞内蛋白作用后，生物膜中活菌比例明显减少，生物膜活性降低，与对照组相比具有差异具有统计学意义（P<0.05）；混合培养的中间普氏菌与牙龈卟啉单胞菌形成的生物膜在血链球菌胞外蛋白作用后，生物膜中活菌比例未见明显减少，与对照组相比差异不具有统计学意义。结论：1.血链球菌胞内蛋白对中间普氏菌和牙龈卟啉单胞菌及混合培养后两种细菌形成的生物膜具有明显抑制作用。2.血链球菌胞外蛋白对中间普氏菌和牙龈卟啉单胞菌混合培养

6、后两种细菌形成的生物膜无抑制作用。关键词：血链球菌；胞内蛋白；胞外蛋白；中间普氏菌；牙龈卟啉单胞菌；生物膜-1-佳木斯大学硕士学位论文AbstractObjective:ToinvestigatetheeffectsofPrevotellaintermedia(P.intermedia)andPorphyromonasgingivalis(P.gingivalis)inbiofilmsbyextractextracellularandintracellularproteinsofStreptococcussanguis(S.sanguis).Methods:1.Ext

7、ractextracellularproteinsofS.sanguisbyhighspeedcentrifugation,usingorganicsolvent.2.Byultrasonic,ammoniumsulfatesaltingout,SephadexG-25columndesaltingthroughdialysistoextractintracellularproteins.3.ObservetheeffectsofP.intermediaandP.gingivaliswhichroledoftheintracellularprotei