电针内关对心肌肥厚大鼠p38mapk信号通路的影响

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1、湖北中医药大学博士学位论文电针“内关”对心肌肥厚大鼠P38MAPK信号通路的影响姓名：吴松申请学位级别：博士专业：针灸推拿学指导教师：王华20120526摘要目的心肌肥厚是许多心血管疾病发展的一个重要阶段，在先天性心脏病、心肌梗死、心脏瓣膜病、高血压等多种心血管疾病中，心肌肥厚是共有的病理过程，持续的外界刺激引起心肌肥厚不断进展，使心肌氧耗量增加及顺应性降低，最终导致心脏扩大、充血性心力衰竭甚至猝死，是心血管疾病患病率和死亡率增加的独立危险因素，随着左室肥厚的发生、发展，猝死、室性心律失常、心肌缺血、心力衰竭等心血管事件的发生率增加6-10倍。药物等

2、治疗取得了较好的疗效，但所带来的副作用和临床效应还需进一步验证，介入疗法虽然能改善患者的生活质量，然而作为有创性的治疗技术不可避免地会发生各种并发症，如血管迷走神经反射、血管内血栓形成、胸闷、胸痛，甚至导致死亡．因此，如何探明心肌肥厚发生机制，积极有效的防治心肌肥厚，减少心血管疾病病死率和发病率已成为国内外心血管领域研究热点和焦点。针灸作为低损伤的治疗方法在心脏病的防治中具有较好的疗效并且己广泛应用于临床。本课题在“心胸内关谋力经验总结和前期研究基础上，运用现代医学理论与实验方法研究电针“内关"对心肌肥厚大鼠心肌组织P38MAPK信号通路的影响及作用

3、机制，对临床防治各种病因的心肌肥厚具有十分重要的理论意义和实用价值。方法3月龄雌性SD大鼠5O只，体重1809左右，查随机数字表分为5组：正常组、模型组、电针组、p38抑制剂组、电针+p38抑制剂组，每组10只。正常组：每日颈背部皮下注射生理盐水3mg／kg·d；模型组：以IS03mg／kg·d颈背部皮下注射14d制备心肌肥厚模型，连续14天；以心电图的改变：QRS波和QT波持续时间延长(QRS>0．1os)，T波形态改变作为造模成功的标志；电针组：每日颈背部皮下注射IS03．0mg／kg，针刺双侧“内关竹深度约5mm，接HANS-200电针治疗仪，

4、选用连续波，频率2Hz，强度为lmA，通电20min，1次／d，14d；p38抑制剂组：每日颈背部皮下注射IS03．0mg／kg，p38丝裂原激活蛋白激酶特异性抑制剂SB203580，以0．3mg／kg／d颈背部皮下注射，连续14d；电针+p38抑制剂组：每日颈背部皮下注射IS03．0mg／kg，SB203580以O．3mg／kg／d颈背部皮下注射，双侧“内关力穴接HANS一200电针治疗仪，选用连续波，频率2Hz，强度为lmA，通电20rain，1次／d，14d。大鼠于第15天称取体重、左心室重量和全心重量，并计算左心室重量指数和全心重量指数，心肌

5、组织HE染色，测量左心室壁平均厚度、心肌细胞平均直径、心肌纤维横径，硝酸还原酶法测定血清和心肌组织N0含量，放射免疫法检测血清和心肌组织TNF-o【、IL-1§含量，免疫组织化学法检测心肌p38MAPK、P—p38MAPK免疫阳性细胞表达；蛋白质免疫印迹法检测p38MAPK、p-p38MAPK活性，运用图象分析系统进行检测，并对数据进行统计分析。结果1．模型组大鼠HW、LvW、HWI、LVWI于造模后升高，均明显高于正常组，有非常显著性差异义(P

6、组，有显著性差异(P<0．05)；电针组、p38抑制剂组、电针+p38抑制剂组之间无显著性差异(p>0．05)。2．模型组大鼠左心室壁平均厚度、心肌细胞平均直径、心肌纤维横径于造模后升高，和正常组比较，有非常显著性差异(P<0．01)；电针组、p38抑制剂组、电针+p38抑制剂组大鼠左心室壁平均厚度、心肌细胞平均直径、心肌纤维横径均明显低于模型组，和模型组比较有显著性差异(P<0．05)，电针+p38抑制剂组和模型组比较，有非常显著性差异(P0．05)．3．正常组心肌细胞染色后心肌结构清晰、完整、均匀，心肌

7、纤维排列整齐，横纹清楚，无形态异常；模型组心肌细胞染色不均，心肌纤维走向紊乱，心肌纤维横径增加，心肌纤维之间的结缔组织疏松水肿、增生，细胞大小不均，心肌细胞直径明显变大，电针组、p38抑制剂组、电针+p38抑制剂组治疗后，心肌细胞稍大，排列尚可，心肌细胞肥厚程度较模型组减Ⅱ轻，心肌纤维排列稍整齐，水肿和增生明显改善。4．模型组大鼠心肌组织和血清NO含量于造模后降低，均明显低于正常组，有非常显著性差异义(P0．05

8、)．5．模型组大鼠心肌组织和血清TNF-0【、IL-ID含量于造模后升高，和正常组比较，有非常显著性差异(P