生物技术在药用植物三叶青中的应用研究进展

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1、第11卷第2期杭州师范大学学报(自然科学版)VoI．1lNO．22O12年3月JournalofHangzhouNormalUniversity(NaturalScienceEdition)Mar．2O12DOI：l1．3969／j．issn．1674232X．2012．02．010生物技术在药用植物三叶青中的应用研究进展杜苏瑞，向太和，李朦(杭州师范大学生命与环境科学学院，浙江杭州310036)摘要：三叶青是一种珍稀的中草药，其提取物含有三叶青黄酮、谷甾醇和多糖等，具有良好的抗肿瘤作用，临床上已经用于抗癌、抗艾滋病毒，治疗

2、血液病、心脑血管疾病、肝炎和病毒性脑膜炎等．该文从三叶青的人工栽培、离体快速繁殖和细胞培养、药用活性成分分析等方面，综述了生物技术应用于三叶青中的研究进展，并对今后研究方向进行了展望．关键词：三叶青；生物技术；应用；进展中图分类号：Q943文献标志码：A文章编号：1674—232X(2012)02—0142—04三叶青，又称为金线吊葫芦或金丝吊葫芦，学名三叶崖爬藤(TetrastigmahemsleyanumDielsetGilg)，为葡萄科(Vitaceae)崖爬藤属植物，是一种极其珍稀的中草药，全草皆有药用价值，其中地下

3、块根和果实的药用效果最好，晒干或鲜用．三叶青的药用价值最早见于《本草纲目》，称“三叶崖爬藤，性味苦、辛、凉，清热解毒、活血祛风”．现代医学研究证实，三叶青对于高热、肺炎、肝炎、胃炎、子宫颈炎、淋巴结核、败血症等严重感染性疾病均有明显疗效[3；特别是三叶青的提取物三叶青黄酮、谷甾醇、多糖等能有效抑制肿瘤细胞增殖，促进肿瘤细胞凋亡，具良好的抗肿瘤作用，且无毒副作用．目前三叶青的提取物已经在临床上用于抗癌、抗艾滋病毒，治疗血液病、心脑血管疾病、肝炎、病毒性脑膜炎等[1．然而，三叶青对生长环境要求非常奇特，它需生长在海拔700m的深

4、山密林和悬崖峭壁的背阴面，上面要有散射光，旁边要有细水渗出，下面要有树叶覆盖，气温保持在18℃左右才有利于其生长，现仅在浙江、广西、江西等山区有少量的自然分布；并且在自然条件下生长速度缓慢．由于三叶青对生长环境要求苛刻，加上无节制的人为采挖，在自然条件下已濒临灭绝；而现代生物技术，尤其是细胞工程和基因工程技术，对三叶青的保护和利用具有重要的意义．目前有关生物技术在三叶青应用研究主要集中在如下几个方面．1三叶青的人工栽培、离体快速繁殖和细胞培养由于三叶青在自然条件下逐渐稀少，为此，人们试图通过各种生物技术来达到繁殖和保护三叶青

5、的目的．牟豪杰和董爱兰采用人工种植的方法，选择海拔为200～800m、土壤颗粒度为2～5mm的山地背阴面，将野生三叶青枝条剪成带有2～3个节的茎段扦插于开耕好的垄上，并覆盖5cm厚的稻草，每年的6～8月份搭建遮荫棚，则第3年即可对三叶青地下块根进行采掘l_1．浦锦宝等通过利用500mg／L的生根粉溶液浸泡插穗的下切口，移栽15d后施用钙肥，也实现了人工繁育三叶青的目的[1．吉庆勇等研究发现收稿日期：2011-09—11基金项目：杭州市科技发展计划项目(20110232B10)．通信作者：向太和(1965)，男，教授，博士，主

6、要从事植物基因工程研究．Email：xthcn@163．com第2期杜苏瑞，等：生物技术在药用植物三叶青中的应用研究进展143利用1000mg／LIBA浸渍三叶青2～3年生老枝插条10S后，扦插于黄土中生根效果最佳；而基质对插穗生根的影响不明显[】．此外，刘杰书等报道对野生的三叶青进行分株后，采取防腐、适当遮光、合理浇水、病虫防治等人工驯化的措施，以利于三叶青的人工栽培与养护[1．在组织培养快繁方面，钱丽华首次报道利用茎段的腋芽和试管不定芽作为起始外植体，通过丛生芽分化途径实现了三叶青的离体快速繁殖口引．徐刚等发明了一种组织

7、培养快速繁殖三叶青的方法，在试管内可以快速大量繁殖三叶青组培苗，月增殖率达3～5倍，年组培苗生产能力每平方米培养室面积可达1万苗以上I]．姜维梅等也报道发明了一种三叶青的组培快速繁殖方法，通过对外植体的选取与处理、诱导培养、增殖培养、生根培养、移栽等步骤实现了三叶青的快速繁殖[2．钟毓倩利用茎尖、带腋芽的茎段和叶作为外植体，研究发现最佳诱导外植体为茎尖，诱导不定芽的培养基配方以MS+2rag／L6一BA+0．2mg／LNAA为最佳，而生根培养基以I／2MS+0．5mg／LIBA+1mg／INAA为最佳．值得一提的是，卢爱芳等

8、以无菌苗叶片、野生三叶青叶片和茎段为外植体，诱导获得愈伤组织，探究用组织培养获得的愈伤组织来快速生产三叶青黄酮的可行性；他们的研究结果发现，三叶青愈伤组织的最佳诱导培养基为2／3MS+2．0mg／I6-BA+2．0mg／INAA，最佳增殖培养基为MS+2．0mg／I6-BA+2．0mg／L