七氟烷后处理对阿霉素诱导新生大鼠原代心肌细胞损伤的影响

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1、论文题目：±氢煊蜃处理型陋霉塞透昱堑生太鼠愿岱!坠盥细胞塑伤的髭9包答辩委员会主席：答辩委员会成员：论文答辩日期：2Q13生三旦!Q目温州医学院坝卜学位论义目录一、中英文缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4二、中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5三、英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7四、前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9五、材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10六、结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16七、分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20八、结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22九、参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23十、附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26十一、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28十二、综述及参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29十三、学位论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37温州I页学院坝Ij学位论义英文缩写c【．SADOXBaxBcl．2cTnlDAPIDMEMDMS0EDTAH202MACMTTNT-proBNP0DPBSSDratsSEVTris英文全称中英文缩略词表(按首位字母顺序)Anti·SarcomericAl

3、phaActininantibodydoxorubicinBcL--2--associatedXproteinBcelllymphoma-2cardiactroponinI4,6··diamidino·-2·-phenylindoleDulbecco’SModifiedEagleMediumdimethylsulfoxideEthylenediaminetetraacetinacidhydrogenperoxideMinimumalveolarconcentration3一(4，5-dimethyl一2一thiahiazo)-2，5一diphenylt

4、errazoliumbromideN··terminalpro··B··typenatriureticpeptideOpticaldensityPhosphate—bufferedsalineSprague-DawleyratsSevofluraneTrisamine中文全称抗肌节辅肌动蛋白抗体阿霉素(多柔比星)B．细胞白血病淋巴瘤一2．相关X蛋白B细胞淋巴瘤／白血病．2肌钙蛋白4，6．联脒一2一苯基吲哚达尔伯克氏改良伊格培养基j二甲基亚砜乙二胺四乙酸过氧化氯最低肺泡有效浓度3．(4，5．二甲基．2．噻哗)．2，5一二苯基四氮唑溴盐氨基术端B型利钠肽6

5、，J．体光密度磷酸盐缓冲液SD大鼠七氟烷三羟甲基氨基甲烷温州医学院倾I．学位论义七氟烷后处理对阿霉素诱导新生大鼠原代心肌细胞损伤的影响中文摘要目的评价阿霉素所致新生大鼠原代心肌细胞的毒性作用，以及评价七氟烷对阿霉素诱导新生大鼠原代心肌细胞损伤的影响。方法取出生24h内的SD大鼠10只，培养大鼠原代心肌细胞，48h后采用免疫荧光染色鉴定心肌细胞。将心肌细胞培养48h后，消化心肌细胞，制成细胞悬液，调整细胞浓度为5×104个／ml，将心肌细胞接种丁I96孔细胞培养板(200gl／孔)或6孔细胞培养板(2ml／孑l,)，采用随机数字表法将细胞随机分为4组(n

6、=15)：正常对照组(C组)、阿霉素组(D组)、七氟烷组(S组)和阿霉素+七氟烷组(DS组)。D组和DS组加入1gmol／L阿霉素孵育，C组和S组加入等容量PBS，孵育24h时，S组和DS组暴露于2．4％七氟烷2h。每组于停止给予七氟烷后继续培养2h，通过MTT法测定细胞活力、ELISA法测定培养液肌钙蛋白(cTnI)和氨基末端B型利钠肽自仃体(NT-proBNP)浓度，免疫组化法测定Bax和Bcl．2蛋白表达水平，计算Bax和Bcl一2的比值(Bax／Bcl一2)。结果1．形态学观察：与C组相比，D组新生大鼠原代心肌细胞搏动减慢，生长停滞，细胞内空泡

7、、颗粒增多，DS组大鼠心肌细胞搏动有所减弱，生长比较缓慢，同时细胞内空泡、颗粒增多，S组心肌细胞形态无明显改变：与D组相比，DS组细胞搏动增强，细胞内空泡、颗粒减少。2．原代心肌细胞活力测定：台盼蓝法和MTT法。(1)台盼蓝法测定新生大鼠原代心肌细胞平均存活率为95％。(2)MTT结果：与C组比较，D组、DS组M7rT值降低(P<0．05)，S组细胞活力差异无统计学意义(P>0．05)；与D组比较，DS组MTT值略微升高，但差异无统计学意义(P>0．05)。3．培养48h后采用免疫荧光法攀定新生大鼠原代心肌细胞纯度为83％。4．免疫细胞化学测定Bax、

8、Bcl一2蛋白表达水、}，-：2jC组比较，Bcl一2蛋白温州阪学院坝l‘学位论义表达降低，B