巴戟天不同炮制品补肾壮阳作用比较探究

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1、巴戟天不同炮制品补肾壮阳作用比较探究[摘要]为了比较巴戟天不同炮制品补肾壮阳药理作用,采用腺嗥吟灌胃给药的方法建立小鼠肾阳虚模型,分别给予巴戟天、巴戟肉、盐巴戟、制巴戟4种炮制品,以桂附地黄丸为对照,以小鼠体征、体重、睾丸系数、精囊腺系数、血清睾酮(T)、血清皮质醇(cortisol)、血清肌酉干(Cr)、组织病理学检查等为评价指标。结果表明,各炮制品均可以改善肾阳虚小鼠的症状,其中盐巴戟组治疗效果最为显著,其次是制巴戟、巴戟肉、巴戟天。该实验结果可为阐明巴戟天炮制原理和补肾壮阳机制提供实验数据。[关键词]巴戟天;炮制;腺嗥吟;肾阳虚;补肾助阳[收稿

2、日期]2013-04-07[基金项目]国家自然科学基金青年基金项目(81001635);国家中医药管理局行业专项(201107007)[通信作者]*贾天柱,教授,博士研究生导师,主要从事中药炮制原理研究,E-mail:jiatz@lnutcm.edu.cn[作者简介]崔妮,硕士研究生,Tel:(0411)87586114,E-mail:cuini0128@126・com巴戟天MorindaofficinalisHow.为茜草科巴戟天属植物。味甘、辛,性微温。具有补肝肾、强筋骨、祛风湿的功效。用于治疗阳痿遗精、宫冷不孕、月经不调、少腹冷痛、风湿痹痛、筋

3、骨痿软[1],是著名的补肾阳药物[2]。2010年版《中国药典》收录巴戟天的炮制品种有巴戟天、巴戟肉、盐巴戟、制巴戟4种[1]。但是各炮制品临床区分不是很明显。巴戟天炮制前后补肾助阳作用是否改变,何种炮制品补肾助阳作用最强,其机制是什么值得深入研究。目前应用普遍的造成动物肾阳虚的方法有几种,其中腺嗥吟造模的方法已被研究人员所公认[3-5],本实验采用灌胃给予腺嗥吟致小鼠肾阳虚模型。前期研究表明巴戟天发挥补肾助阳作用的有效成分主要为其醇提物,故本实验比较巴戟天不同炮制品醇提取物对HPA轴功能改善、性功能及生殖功能的影响,说明药效变化情况并探讨其作用机制

4、。1材料电子天平(上海友声衡器有限公司);涡旋混合器(上海青浦沪西仪器厂);离心机(上海安亭科学仪器厂);恒温恒湿箱(上海一恒科学仪器有限公司);酶标仪(上海赛默飞世尔仪器有限公司);石蜡切片机(德国LEICA公司);BX51生物显微镜(日本奥林巴斯)。腺嗥吟(adenine),购自北京索来宝科技有限公司,批号201208012;桂附地黄丸,北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂,批号1016341;睾酮(T)、皮质醇(cortisol)、肌(Cr)Elisa试剂盒,购自上海科兴商贸有限公司;95%乙醇、聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯(吐温-80)为分析纯

5、;巴戟天药材购自亳州药材市场,产地为广西,经辽宁中医药大学鉴定教研室李峰教授鉴定为茜草科植物巴戟天M.officinalis的干燥根。昆明种雄性小鼠,体重26-30g,由大连医科大学实验动物中心提供,许可证号[SCXK(辽)2008-0002],合格证号0002037c参照药典方法制备巴戟天、巴戟肉、盐巴戟、制巴戟,取巴戟天各炮制品30g,以10倍量80%乙醇热回流提取2次,每次1.5h,合并滤液,浓缩得醇浸膏。各炮制品提取物分别加吐温-80稀释至105g•L-lo2方法2.1造模与给药雄性小鼠随机分为7组:正常对照组,模型对照组,桂附地黄丸组,巴戟

6、天组,巴戟肉组,盐巴戟组,制巴戟组。每组12只。除正常对照组外,其余6组用腺嚓吟连续灌15d,灌胃量为150mg•kg-1,造成肾阳虚模型。按生药量折算后[6],桂附地黄丸组给予3.7g-kg-1的药物,巴戟天各炮制品组灌胃给予2.1g-kg-1的相应药物,正常对照组和模型组给予等体积的0.4%吐温-80,每日1次,连续152.2检测指标观察小鼠的身体状况和活动情况。给药期间记录小鼠的体重变化情况。实验结束时,对各组小鼠进行挖眼球取血,分离血清进行睾酮(T)、皮质醇(cortisol)、肌肝(Cr)的含量测定。采血完毕立即剖取小鼠睾丸、精囊腺计算各组

7、小鼠睾丸系数和精囊腺系数;剖取肾脏、睾丸于10%甲醛中固定,常规切片,HE染色,待做组织病理学检查。2.3统计学分析数据资料以土s表示,组间比较采用单因素方差分析。数据分析采用统计软件SPSS19.0o3结果2.1动物一般情况正常对照组小鼠较其余各组明显肥大,皮毛干爽光滑,精神状态良好,活泼好动。模型对照组小鼠动物明显消瘦,体毛疏松,精神萎靡,反应迟钝,弓背萎缩,活动减少,畏寒多尿,出现满月脸、大白肾等典型的肾阳虚症状。其余各组前期与模型组出现相同的体征,桂附地黄丸组、盐巴戟组、制巴戟组小鼠的后期症状明显减轻。正常对照组小鼠体重较其余组有显著差异,其

8、余各组无显著差异。见图lo图1各组小鼠体重变化情况Fig.1Themiceweightchangesofdi

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