isolating dna rna protein流程图

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1、测吸光度，鉴定IsolatingDNA/RNA/ProteinfromAnimalTissue分离程序在室温孵育度2分钟，13000×g离心1分钟，收集流出液每mlbufferGTC加入20ul2-巯基乙醇（此混合物可在室温下保存1周）用50-100ulElutionBuffer洗脱DNA吸取700ulbufferGTC于玻璃匀浆器中加入30mg脑组织柱子转移到一个干净的1.5ml离心管在bufferGTC中破裂和充分匀浆组织（务必充分匀浆）用空收集管以≧13000×g离心2分钟以完全干燥离心柱匀浆液转入1.5ml离心管中弃去流出液，2毫升收集管可再使用室温下1

2、3000×g离心5分钟室温下13000×g离心5分钟加入700ul已稀释的DNAWashBuffer在一2ml收集管内插入HiBind®DNA柱弃去流出液，2毫升收集管可再使用小心地将澄清的上清液转移至HiBind®DNA柱上（勿吸入沉淀或脂肪组织）室温下13000×g离心5分钟轻柔的盖上盖子，≥13,000g离心1min（确保所有的细胞裂解液均已通过柱子，必要时可再离心）加入500ulBufferHBHiBind®DNA柱放入另一新的2ml收集管，室温下保存流出的裂解液中加入350ul无水乙醇漩涡混匀15秒在一2ml收集管内插入HiBind®RNA离心柱将上述

3、混合物转移到HiBind®RNA离心柱上（分次装载）室温下13000×g离心1分钟吸取500ulRNAWashBufferI直接加入HiBind®RNA离心柱上洗涤柱子流出液转移至一新的管子用于蛋白质提取加入4倍体积冰冷的丙酮，漩涡充分混匀室温下13000×g离心1分钟在-20℃下孵育30分钟弃去流出液，2毫升收集管可再使用在最大速度4°C离心10分钟加入500ul已经用无水乙醇稀释过的RNAWashBufferII至柱上用1ml冰冷的无水乙醇洗涤沉淀室温下13000×g离心1分钟在最大速度4°C离心3分钟弃去流出液，2毫升收集管可再使用重复上述操作一次弃去液体

4、并风干用buffer溶解蛋白质用于下游分析用空收集管以≧13000×g离心2分钟以完全干燥HiBind®离心柱柱子转移到一个干净的1.5ml离心管加30-70ul预热至70℃DEPC水于柱子上洗脱RNA室温放置5min13000×g离心1分钟，收集流出液测吸光度，鉴定